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沉默是金的下一句

2015-12-18 09:54:09 成考报名 来源:http://www.chinazhaokao.com 浏览:

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欢迎来到中国招生考试网http://www.chinazhaokao.com/成考报名栏目,本文为大家带来《沉默是金的下一句》,希望能帮助到你。

沉默是金的下一句篇一
《沉默是金》

沉默是金

群处守住嘴,独处守住心。实际上是教人如何立身处世。

群处守住嘴。在与别人相处时,注意自己的语言。与别人相处,夸夸其谈,似乎眼界开阔,知识渊博,积淀丰厚,岂不知给人的感觉是轻薄、肤浅和狂妄。与别人相处,想说即说,毫无遮拦,毫无回避,往往无意中伤害他人。

沉默是金,这句极其朴素的语言蕴含着极其耐人寻味的道理。­

沉默并不代表思维停止。深邃的思想往往来源于貌似沉默的思索过程。暂时沉默的人,在沉默中积极思考,在听取中有效取舍,往往能抓住要害,点石成金,足见真知灼见,令人感佩折服。­

沉默并不代表思想空虚。沉默是一个蓄势等待的过程,大地的沉默是在孕育着金秋的收获,雄鹰的沉默是在等待着振翅的高飞,严冬的沉默是在集结着姹紫嫣红的春天。

沉默是积蓄待发。人们常为成功者鼓掌喝彩,却不知他们甘于沉寂、甘

于缄默的精神。正所谓大器晚成,大音希声,不鸣则已,一鸣惊人是也。­

沉默是一种品质,是一种修养,要的是对自己的苛刻约束,要的是对自己意志的严峻考验,要的是不卑不亢的坚持和忍耐。­

独处守住心。古人云,君子之心,昭之天下,不可使人不知。即君子要坦坦荡荡。喧嚣世尘,势利纷争,生活在这个世界上,难免会遇到不顺心、不如意的事情。如何处理好这些事情恰恰是对人的德行的严峻考验。

每每当夜深人静时,独自内观其心,自己的真实面目就会浮现眼前。经常反思,你就会觉得真我的显现让平时欺瞒你的假我原形毕露,于此中你会羞愧难当,会真正善待灵魂深处的真我。这样形成一种习惯,你的境界就会得到不断的提高。所以,论语中说,吾日三省吾身是也。

一个人独处时,常常想着别人对自己的好处,你就会善待每一个人。那么,你就愿意为他付出,愿意与他接好,人与人之间的友谊就会地久天长。­

一个人独处时,常常想着自己对别人的好处,你就会让自己的自我优越

感不断膨胀,从而失去真我的本性。当他因为一时一事做得对你不利的时候,你就会感到委屈,感到不舒服,就会找一个理由惩治他,这不利于自我人格的完善,也不利于人际关系的和谐。

所以,当你遇到快乐时,你要记得克制,因为得意忘形,忘形伤本,忘本失性。当你遇到困惑时,你要退一步思想,因为退一步海阔天高。

一念善,皆是善。一念恶,皆为恶!所以要养成群处守口,独处守心的良好习惯!

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沉默是金的下一句篇二
《沉默是金》

沉默是金

龙山产业园安家庄小学武秀霞

古语说得好“沉默是金”。确实,班主任在教育过程中若能恰到好处地运用“沉默”艺术,往往能对孩子传递出丰富的难以言表的信息,起到“此时无声胜有声”的教育功效。

下面是我在班级管理中的一个成功案例。

星期三上午第三节课是信息课,需要整队去微机室。孩子们还未从大课间的闹腾中安静下来,排队时,说话的,大闹的,叫嚷的,推搡的,整个教室一片混乱。我站在讲台上,静静地看着讲台下的孩子们,一反以往用提高声音来镇压的做法。孩子毕竟是孩子,教室依旧如原先一样,阵阵高高低低的噪音,刮过我的耳膜。我皱了皱眉头,然而,我依旧静静地抱着手臂,一言不发,不过不同的是,我用我的目光,扫视着教室。说不清楚那是怎样的一种目光,不过,我知道它的作用,因为我看到当我盯住那一个调皮的孩子时,他立即收敛,站到了队伍里去。墙上的钟,分针在一圈一圈地转着......

也许是因为看到了我的一言不发,孩子们互相提醒着,教室终于安静下来。他们似乎在等待着我下一句不知是斥责还是批评,我看到他们的脸上,表情,眼睛,躲躲闪闪。当教室安静地地上掉下一根针也能听到时,我慢慢地走下讲台,走到教室的第一排。

“刚才我看了时间,你们排队花了五分钟,也就是浪费了五分钟,我知道大家很喜欢信息技术课,但是你们刚才的表现好像是告诉老师,你们不想去上课,既然如此,那么老师就让同学们在教室里先待了五分钟。”我不紧不慢,声音非常平和。我知道,这一招,很灵。这帮孩子个个都爱上信息技术课,每次都巴不得早点去教室,好打开心爱的电脑,趁老师还没来痛快地过把瘾。现在让他们足足比平时要迟五分

钟离开教室,信息教室又在教室最后一排,他们可难受了。这时我对同学们说:“五分钟到了,好了,记住,下次如果你们想早点过去,时间都掌握在你们自己手里,早早整好队,就能早点去教室,并且我会让那些自觉排队,动作迅速的同学先去微机室,其他同学就眼红吧。”我摸摸前排一个“小调皮”的脑袋,只见他还有班里另外几个学生对我不好意思地吐了吐舌头。终于,在将近7分钟之后,孩子们安静有序地走进了微机室。

从那以后,每次上信息课没用我再维持秩序,孩子们早早的排好队,整装待发。

这件事让我明白,批评作为教育的一种手段,应该注意到它对孩子心理的影响。我没有用言语过分地责备,而是通过老师的沉默,让学生体会到自己做错了事。这种独特的无声批评方式恰恰为孩子提供了反省的契机,让孩子学会自觉反省自己的行为,提高自我反思能力。真可谓此时无声胜有声。

沉默是金的下一句篇三
《沉默是金》

沉默是金的下一句篇四
《国家公务员考试面试真题回顾:如何处理“沉默是金”和“知无不言”》

【真题题干】与同学交往中,你怎么处理“沉默是金”和“知无不言”?(2011年2月23日国考陕西省国税系统面试真题)

【参考答案】

与人交往是一门艺术,言语的交流就是人与人交往的基础。有时候,一个人的只言片语就会透露出他的品德和修养,而这些就决定了这个人一生的成就;同样的,古人云“一言可以兴邦,一言也可以误国”,也是在说语言交流的重要性,所以,交流时把握好分寸十分重要。

“沉默是金”和“知无不言”是在与同学交往中两种不同的态度,“沉默是金”是指一个人不轻易发表自己的看法,不随便议论他人。“知无不言”是当遇到别人求助的时候,要把自己所知道的全部都告诉他人,尽自己最大的努力帮助他人。

在与同学交往的过程中,当有同学在议论是非的时候我选择“沉默是金”,毕竟在背后议论他人是不好的行为;当同学们把秘密告诉我时,我只是倾听,不会告诉他人,做一个能保守秘密的人;当自己的行为被同学误会的时候,我也会主动向他解释,而不会大吵大闹,解释清楚,并引以为戒。在公共场合和同学相处,我也要注意说话的分寸;有些话少说,甚至不说,比如指出别人缺点,这些可以单独交流,并诚恳地提出自己的建议,帮助同学成长。

当同学向我寻求帮助的时候,我会在不违反原则的情况下将自己所知道的全部内容都告诉他,“予人玫瑰,手有余香”,当自己有困难的时候,同学也会尽力来帮助我,因此这也是我有很多朋友的原因。当我帮助朋友的时候,我能更快地完成很多事情,也更快地提升自己。因此,对于朋友的求助,我会毫不犹豫地给予帮助。

总之,与人交往是人生中的一门大学问,对于交流中“沉默是金”与“知无不言”的问题,我觉得要看具体情况,要做到具体问题具体分析,并且还需要践行,毕竟人生中的经验与阅历是需要积累的。

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沉默是金的下一句篇五
《国家公务员考试面试真题回顾:如何处理“沉默是金”和“知无不言”》

国家公务员考试面试真题回顾:如何处理“沉默是金”和“知无不言”

【真题题干】与同学交往中,你怎么处理“沉默是金”和“知无不言”?(2011年2月23日国考陕西省国税系统面试真题)

【参考答案】

与人交往是一门艺术,言语的交流就是人与人交往的基础。有时候,一个人的只言片语就会透露出他的品德和修养,而这些就决定了这个人一生的成就;同样的,古人云“一言可以兴邦,一言也可以误国”,也是在说语言交流的重要性,所以,交流时把握好分寸十分重要。

“沉默是金”和“知无不言”是在与同学交往中两种不同的态度,“沉默是金”是指一个人不轻易发表自己的看法,不随便议论他人。“知无不言”是当遇到别人求助的时候,要把自己所知道的全部都告诉他人,尽自己最大的努力帮助他人。

在与同学交往的过程中,当有同学在议论是非的时候我选择“沉默是金”,毕竟在背后议论他人是不好的行为;当同学们把秘密告诉我时,我只是倾听,不会告诉他人,做一个能保守秘密的人;当自己的行为被同学误会的时候,我也会主动向他解释,而不会大吵大闹,解释清楚,并引以为戒。在公共场合和同学相处,我也要注意说话的分寸;有些话少说,甚至不说,比如指出别人缺点,这些可以单独交流,并诚恳地提出自己的建议,帮助同学成长。

当同学向我寻求帮助的时候,我会在不违反原则的情况下将自己所知道的全部内容都告诉他,“予人玫瑰,手有余香”,当自己有困难的时候,同学也会尽力来帮助我,因此这也是我有很多朋友的原因。当我帮助朋友的时候,我能更快地完成很多事情,也更快地提升自己。因此,对于朋友的求助,我会毫不犹豫地给予帮助。

总之,与人交往是人生中的一门大学问,对于交流中“沉默是金”与“知无不言”的问题,我觉得要看具体情况,要做到具体问题具体分析,并且还需要践行,毕竟人生中的经验与阅历是需要积累的。

文章来源:安康人事考试网(

沉默是金的下一句篇六
《摘抄 沉默的大多数》

1.明辨是非难,是因为这些是非都在伦理的领域之内。俗话说得好,此人之肉,彼人之毒;一件对此人有利的事,难免会伤害另一个人。真正的君子知道,自己的见解受所处环境左右,未必是公平的;所以他觉得明辨是非是难的。2.在萧翁的《芭芭拉少校》中,安德谢夫家族的每一代都要留下一句至理名言。其中有一句是:人人有权争胜负,无人有权论是非。这话也很有意思,但它是句玩笑。实际上,人只要争得了论是非的权力,他已经不战而胜了。我对自己的要求很低:我活在世上,无非想要明白些道理,遇见些有趣的事。倘能如我所愿,我的一生就算成功。3.沉默是一种人类学意义上的文化,一种生活方式。沉默有自己的语言。它的价值观很简单:开口是银,沉默是金。一种文化之内,往往有一种交流信息的独特方式,甚至是特有的语言,有一些独有的信息,文化可以传播,等等。这才能叫作文化。4.戈尔巴乔夫说过这样的话:有一件事是公开的秘密,假如你想给自己盖个小房子,就得给主管官员些贿赂,再到国家的工地上偷点建筑材料。这样的事干得说不得,属于沉默.5.沉默的说明总是要滞后于沉默。6.本土的词儿最常用有两个,一个太粗,根本不能写。另外一个叫作“敦伦”。这个词儿实在有意思。假如有人说,他总是以敦厚人伦的虔敬心情来干这件事,我倒想要认识他,因为他将是我所认识的最不要脸的假正经。为了捍卫这种神圣性,做爱才被叫作“敦伦”。7.菲尔丁曾说,既善良又伟大的人很少,甚至是绝无仅有的,所以这种脑移植带给我的不光是善良,还有愚蠢。在此我要很不情愿地用一句功利的说法:在现实世界上,蠢人办不成什么事情。我自己当然希望变得更善良,但这种善良应该是我变得更聪明造成的,而不是相反。更何况赫拉克利特早就说过,善与恶为一,正如上坡和下坡是通一条路。不知道何为恶,焉知何为善?所以他们要求的,不过是人云亦云罢了。8.丹麦王子哈姆雷特说:活着呢,还是死去,这是问题。9.马克·吐温的最后一个问题深得我心:你是知道我的生活方式的。有什么方法能使我不上天堂而下地狱,我倒很想知道!言下之意是:忍受地狱毒火的煎熬,也比闲了没事要好。是啊是啊!我宁可作个苏格拉底那样的人,自以为一无所知,体会寻求知识的快乐,也不肯作个“智慧满盈”的儒士,忍受这种无所事事的煎熬!10.自私:马斯洛发现心理健康的人,既自私又无私,健康的人以一种健康的方式自私,这种方式既有益于他又有益于社会。(见《第三思潮--马斯洛心理学》

上海译文出版社1987年2月版 第30页。)自私是人的天性,这和性欲一样,就是上帝也禁不了的,允许人们利用这一天性,在不损人的情况下追求自身的富足和快乐,是文明社会尊重人的标志,也是商业社会的人性逻辑。(见《道德黑话》载《杂文报》1998年1月23日3版。)世界上的一切人之中,我最希望提升的一个人,就是我自己。这话很卑鄙,很自私,也很诚实。(见《沉默的大多数》王小波著中国青年出版社1997年10月版 第19页。)

沉默是金的下一句篇七
《沉默是金(1)》

沉默是金(1)

然坚持事实,敢于反抗赵高的威势,但最终还是以失败告终。沉默不言的是明哲保身,既不愿意奉承赵高也不敢反对赵高,选择了沉默,沉默是大智慧,沉默是金。

春秋时代,越国被吴国打败,越王勾践卧薪尝胆,选择了沉默,经过长期准备,越国终于打败了吴国,沉默凝聚着力量,只有厚积勃发,后发制人,恰到好处,才能克敌制胜,沉默是冷静,沉默是金。

古往今来,能说会道的人很多,但最终成就了大事业的又有几个呢? 纸上谈兵的赵括铁齿铜牙,最终全军覆没;做完再说或不说的闻一多先生闲静少言最终成就一番事业;隐居山林的诸葛亮事一鸣惊人,终成三国鼎立之势;面对跨下之辱韩信选择沉默,终成一代名将„„于是智者喊出了“沉默是金”。

孔老夫子云:“君子欲讷于言而敏于行”。在智者看来,实际行动比夸夸其谈更有意义,飞机的发明者莱特兄弟遨游蓝天之后。在一次庆功宴会上说:“鸟类当中,鹦鹉是最能说的,但鹦鹉是飞不高的”所以“沉默是金”。 沉默是一种气质,也是一种风度,更是一种品格。如果没有沉默,就没有孕育,就没有震荡,就没有突破。蛾在沉默了一冬之后,终于把飞的梦幻变成现实;海在沉默了一时之后,终于把惊涛的壮观推出了地平线。朝霞在沉默了一夜之后,终于把绚烂的光彩洒向大地,禾苗在沉默了一季之后,终于把丰富的营养献给人间。总而言之,沉默是金。

沉默是金的下一句篇八
《职场生存法则之沉默是金》

职场生存法则之沉默是金~~~

We chat with our colleagues all the time: when we have lunch, gossip in the tearoom, or leave work together.

我们每时每刻都在与同事聊天:午饭时,茶水间八卦时间,抑或是一起下班时。

Sharing your personal life brings you closer to your co-workers and builds trust within your team. But revealing too much about yourself to colleagues,

managers or human resources staff can cause difficulties and even endanger your work.

分享私人生活可以增进你和同事间的关系,在团队中建立信任。然而,在同事、经理、人事面前过多地暴露自己会引起麻烦,甚至会危机到你的工作。

It's crucial to strike the right balance between getting along with colleagues and maintaining your privacy.

在协调同事关系与保护个人隐私之间保持完美平衡,这点至关重要。

"Communication in the office is tricky. You can neither spread chatter, nor be too silent and shut yourself off from others," said Yang Yudan, deputy HR director at P&G.

"办公室中的交流很复杂。你既不能过于长舌,也不能太沉默,拒人于千里之外。"宝洁中国人力资源副总监杨宇丹表示。

According to her, there are several safe topics to talk about with colleagues during the break, such as the weather or movies. Women like to talk about makeup and clothing, while men are fond of sports and online games.

她表示,休息时可以和同事聊些比较保险的话题,比如天气或者电影。女士们喜欢谈论化妆品和服饰,而男士们则钟爱运动和网游。

But discussing your private life, such as relationship, habits or health conditions, is a potential minefield.

但是讨论感情,嗜好或健康状况这类的个人私生活,这会成为一个潜在的雷区。

Cui Xiaxia, 21, who has been working for an IT company for only two months, learned this the hard way when she found out that everyone knew she had broken up with her boyfriend.

21岁的崔霞霞(音译)在一家IT公司工作了仅仅两个月时间。她通过个人的惨痛教训学到了这点,当时她发现所有人都知道了她与男友分手的事情。

"I spoke about it with two colleagues in the tearoom and told my clients via phone, and then the news spread."

"我在茶水间和两个同事说了这事,又在电话里告诉了我的客户。然后,消息就传开了。" Her boss finally heard about it and asked her not to let it affect her work performance.

最终,她的老板也听说了这事,提醒她不能让私事影响到工作。

Xu Peng, a human resources director at Gree Electric Appliances Inc in Zhuhai, says that it is improper to talk about private matters on formal occasions, for instance when your boss is assigning work.

珠海格力电器人力资源部部长许鹏表示,在正式场合谈论私事有欠稳妥,比如老板正在分配工作时。

"On Monday we had our weekly meeting to discuss work. Two female colleagues were talking about how they spent the weekend traveling with their boyfriends and buying new clothes," Xu said. "It was inappropriate."

"周一我们在周会上讨论工作,有两个女同事却一直在说周末与男友出游、买新衣服的事,"许鹏说。"这就是不合时宜的。"

Sometimes revealing private matters in an indiscreet manner can result in disastrous consequences.

有时,轻率地泄露隐私会导致灾难性的后果。

Liang Kun, 26, had to resign from his job at a trading company in Guangzhou last week after discussing her income with colleagues during a lunch break. "I didn't realize it was such a serious issue until a senior member of staff went to find the boss, asking why I got a higher salary than her," said Liang.

26岁的梁坤(音译)供职于广州一家贸易公司。一次午餐时间,他与同事讨论了自己的收入情况;然而就在上周,他不得不辞掉这份工作。"直到一位老员工去找老板,询问为什么我的工资比她高时,我才意识到事情的严重性。"梁坤说。

"Then our HR told me that according to the employee handbook it is forbidden to talk about remuneration in the office."

"之后,人事告诉我,公司员工手册规定,禁止在办公室谈论报酬。"

HR expert Yang also reminds us that paychecks are your own business. It is unwise to share this information with others, no matter how close you are. 人力资源专家杨宇丹也提醒我们,薪水是你的私事。不管你与同事们多亲密,分享这方面的信息绝非明智之举。

"Before you start working for a new company, you should ask about its privacy policy," she suggested. "Some companies explain this in their contracts or employee handbooks, and you should strictly obey the rules."

"在进入一家新公司工作之前,你应该先询问它的隐私政策,"她建议道。"有些公司在合同或员工手册中会对此进行说明,而你应该严格地遵守这些规定。"

To summarize, Yang advises office workers to be more aware of the image they project when talking to colleagues. "When you share your personal life, it will be recorded on your invisible resume and may slow down your career

progression."

简而言之,杨宇丹建议,职场人士在与同事聊天时应该多注意自身形象。"当你分享私人生活时,这些都会被记录在无形的简历上,也许会妨碍你日后升迁。"

沉默是金的下一句篇九
《2013年经典语句和歇后语》

2013年经典语句和歇后语

1.钢丝穿豆腐~别提了。-

2.鞭炮两头点~想(响)到一块了。-

3.吃鱼不吐骨头~说话带刺。.-

4.厨房里的灯~常常受气。-

5.八百年前立的杆~老光棍。-

6.擦粉进棺材~死要面子。-

7.财神爷要饭~装穷。-

8.搭棚子卖绣花针~买卖不大,架子不小。-

9.打发闺女,娶儿媳~两头忙。-

10.抱黄连敲门~苦到家了。-

11.冰块掉进醋缸里~寒酸。-

12.带着存折进棺材~死要钱。-

13.刀砍大海水~难舍难分。-

14.到手的肥肉换骨头~心不甘。-

15.雕像匠不给神像扣头~知道老底。-

16.东扯葫芦西扯瓢~故意找茬儿。-

17.冬天的大葱~皮干叶烂心不死。-

18.冬天火炉夏天扇~用得上。-

19.兜里的钱,锅里的肉~跑不了。-

20.毒蛇钻进竹筒里~假装正直-

21.赌徒的嘴巴~尽说到点子上。-

22.渡船过河~划得来。-

23.断柄锄头~没把握。-

24.儿媳妇大肚子~装孙子。-

25.饭桌上的抹布~尝尽了酸甜苦辣。-

26.粪堆上开花~臭美。-

27.赶庙的失孩子~活丢人。-

28.擀面杖作筷盆作杯~大吃大喝。-

29.刚出炉的铁~心地纯正。-

30.寡妇打孩子~舍不得。-

31.棺材铺的生意~赚死钱。-

32.寒山寺的大钟~搬不动。-

33.和尚挖墙洞~妙(庙)透了。-

34.候车室里的挂钟~群众(众人)观点。-

35.虎口拔牙~胆子不小。-

36.葫芦瓢捞饺子~滴水不漏。-

37.黄豆切细丝~功夫到家了。-

38.浑身贴膏药~毛病不少。-

39.急惊疯碰着个慢郎中~干着急。-

40.叫花子唱歌~假快活。-

41.井底下写文章~学问不浅。-

42.井里的吊桶~任人摆布。

43.九月的甘蔗~甜到心。-

44.开水锅里洗澡~熟人。-

45.看见岳父不搭腔~有眼不识泰山。-

46.看天说话~眼光太高。..-

47.考上秀才盼当官~欲无止境。-

48.瞌睡遇到枕头~求之不得。-

49.吃菠萝问酸甜~明知故问。-

50.口袋里装钉子~个个想出头。-

51.苦瓜树上结黄连~一个更比一个苦。-

52.拉屎啃鸡腿~亏他张得开口。-

53.老子偷瓜儿盗果,老子杀人儿放火~一辈更比一辈坏。-

54.雷声大雨点小~有名无实。-

55.梁山上的军师~无(吴)用。-

56.两个羊羔打架~对头。-

57.聋子看戏~饱眼福。-

58.马槽边上的苍蝇~混饭吃。-

59.满上跑的兔子不回家~野惯了。-

60.南来的燕,北来的风~挡不住。-

61.老大懒,老二勤~一不做,二不休。-

62.狼也跑了,羊也保了~两全其美。-

63.吃饱了溜大圈~撑的了。.-

64.长江里的石头~经过风浪。-

65.苍蝇叮菩萨~没人味。-

66.背着娃娃推磨~添人不添劲-

世上怎么会有这么精辟的话呢?

1,昨晚我拿你的承诺去喂狗,第二天早上发现狗死了。

2,在这个薄情年代,要想别人对你念念不忘,最好的办法就是欠钱不还。

3,吃货的人生就像一列火车,总结起来就是,逛——吃,逛——吃,逛——吃。

4,新时代的女性,上的了厅堂,翻的了围墙,斗的了小三,打的了流氓,就是下不了厨房。 5,不想接我电话就直说,别老是让人家移动帮你对我说对不起........

6,没心没肺,能活百岁,问心无愧,做人不累。

7,好朋友不需要太多,两个就够了,一个肯把钱借给你,当问你要债时,另一个会替你还钱-- 8,不是我不想当淑女,是生活把老娘逼成了泼妇...........

9,总觉得,床铺的太整齐,会有点安度晚年的意思。恩,还是凌乱些,比较有朝气......

10,脑袋空不要紧,关键是不进水。

11,地理老师问:四大洋分别是哪个?我答:喜羊羊,美羊羊,懒羊羊,沸羊羊。

12,我对着镜子说:镜子,镜子,我是不是这个世界上最美丽的?镜子碎了。

13,喜欢我的人都是好人。不喜欢我的都是坏人。讨厌我的都不是人。

14,我长的很耐看,你要耐着性子看。

15,开车无难事,只怕有新人!

16,我拿着丘比特的弓箭追啊追,你穿着防弹背心飞啊飞!

17,遇到你之前,我的世界是黑白的,遇见你之后,哇靠,全黑了。

18,我感觉你像两头猪,因为一头猪已经不能形容你的蠢。

19,我爱你的时候,你打我骂我,我都忍了,我不爱你了,你再碰我试试。

20,今天客户到银行取定期,坐下一句话说的我晕倒了,“你好,我死期到了。”

21,失败的男人,背后总有个多事的女人。

歇后语看什么时候用 1、俗话说:好马不吃回头草;可俗话又说:浪子回头金不换!

2、俗话说:兔子不吃窝边草;可俗话又说:近水楼台先得月!

3、俗话说:宰相肚里能撑船;可俗话又说:有仇不报非君子!

4、俗话说:男子汉大丈夫,宁死不屈;可俗话又说:男子汉大丈夫,能屈能伸!

5、俗话说:知无不言,言无不尽;可俗话又说:交浅勿言深,沉默是金!

6、俗话说:车到山前必有路;可俗话又说:不撞南墙不回头!

7、俗话说:人不犯我,我不犯人;可俗话又说:先下手为强,后下手遭殃!

8、俗话说:礼轻情谊重;可俗话又说:礼多人不怪!

9、俗话说:一个好汉三个帮;可俗话又说:靠人不如靠己!

10、俗话说:人往高处走;可俗话又说:爬得高,摔得重!

11、俗话说:瘦死的骆驼比马大;可俗话又说:拔了毛的凤凰不如鸡!

12、俗话说:宁为玉碎,不为瓦全;可俗话又说:留得青山在,不怕没柴烧!

13、俗话说:人不可貌相,海水不可斗量;可俗话又说:人靠衣裳马靠鞍!

14、俗话说:苦海无边,回头是岸;可俗话又说:开弓没有回头箭!

15、俗话说:退一步海阔天空;可俗话又说:狭路相逢勇者胜!

16、俗话说:三百六十行,行行出状元;可俗话又说:万般皆下品,唯有读书高!

17、俗话说:书到用时方恨少;可俗话又说:百无一用是书生!

18、俗话说:金钱不是万能的;可俗话又说:有钱能使鬼推磨!

19、俗话说:出淤泥而不染;可俗话又说:近朱者赤,近墨者黑。

20、俗话说:青出于蓝而胜于蓝;可俗话又说:姜还是老的辣!

21、俗话说:后生可畏;可俗话又说:嘴上无毛,办事不牢!

22、俗话说:有缘千里来相会;可俗话又说:不是冤家不聚头!

23、俗话说:在天愿作比翼鸟,在地愿为连理枝;可俗话又说:夫妻本是同林鸟,大难来时各自飞!

24、俗话说:得饶人处且饶人;可俗话又说:纵虎归山,后患无穷!

25、俗话说:善有善报,恶有恶报;可俗话又说:人善被人欺,马善被人骑!

26、俗话说:一分耕耘、一分收获;可俗话又说:人无横财不富,马无夜草不肥!

27、俗话说:小心驶得万年船;可俗话又说:撑死胆大的,饿死胆小的!

28、俗话说:量小非君子;可俗话又说:无毒不丈夫!

29、俗话说:小不忍则乱大谋;可俗话又说:不蒸馒头蒸(争)口气!

30、俗话说:人人为我,我为人人;可俗话又说:人不为己,天诛地灭!

31、俗话说:不入虎穴,焉得虎子;可俗话又说:老虎屁股摸不得!

32、俗话说:百事孝为先;可俗话又说:忠孝不能两全!

33、俗话说:人定胜天;可俗话又说:天意难违。

34、俗话说:明人不做暗事;可俗话又说:兵不厌诈!

沉默是金的下一句篇十
《2013-RNAi沉默是金》

沉默是金:强大的RNAi筛选技术

2013-08-12 来源:biodiscover 作者:koo 425 0

在过去,想要发现哺乳动物细胞的重要生理过程,通常需要通过化学突变或将转座子插入到基因组中对细胞内的基因进行干扰。但是,大约10年前,RNA干扰(RNAi)技术的出现改变了这种状态。这项技术的核心是,设计一个短链RNA,使其在转录过程中与目的基因序列互补结合,从而阻止目的基因翻译成蛋白。RNAi技术的问世,使得对哺乳动物体内每一个细胞内基因进行干扰成为了可能。

“这个技术的出现开辟了了解哺乳动物基因功能的一个全新领域。”美国国家卫生研究院国家转化科学推进中心从事RNAi筛选的科学家Scott Martin说。利用RNAi筛选方法已经发现了许多关键的细胞过程,如细胞增殖、细胞凋亡和细胞复制等。

尽管近年来RNAi筛选技术在不断提高,我们拥有了更多有效的RNA探针来干扰目标基因,但是这项技术也存在一定的缺陷。“脱靶效应是主要的限制,” Martin说。你需要采取一定的措施来清除用以沉默靶基因的RNAis而不是靶基因本身,并且还要确保你所选取的靶基因真正参与了某种细胞过程。此外,能正确地选择最适合的文库和筛选方式也是一项挑战。

目前,科学家们正在进一步挖掘RNAi技术潜在的强大功能。

RNAi筛选方式的选择

为了沉默哺乳动物细胞中的基因,研究人员将21-25个核苷酸长度的双链RNA(siRNA)利用细胞转染的方法导入细胞,在这种导入方法中,siRNA与脂质囊泡结合,通过细胞的内吞作用或膜融合进入细胞内部。被导入的双链RNA解旋后,其中一条链被纳入一个细胞蛋白质复合体,称为RNA诱导的基因沉默复合体(RISC)。RISC与目标基因结合后分解,这样一来,能与目的基因某一段序列互补的短RNA就能与靶基因某段序列互补结合,从而阻止它们所编码的蛋白质的产生。另外, RNAi也可以通过向病毒导入设计好的短发夹RNA(shRNA)进入细胞并在细胞内复制得以实现。

因此,进行RNAi筛选的第一步是搞清楚应该使用siRNA还是shRNA文库。决定这一点的因素之一就是你所要处理的是什么类型的细胞。虽然大多数类型的细胞包括永生化细胞系,使用转染的方式更佳,也有一些只能在悬浮液中生长的细胞类型,例如免疫细胞、某些原代细胞培养和活体组织细胞不适合转染的方法。虽然有一些方法可以帮助siRNA分子进入不能使用转染方法的细胞,如尝试不同的脂类试剂或者代替脂质载体、利用电脉冲来创建瞬态膜孔(电穿孔),但是一些细胞仍然破裂了。在这种情况下,就需要使用shRNA方法。

siRNA和shRNA之间的选择也可以理解成基因沉默效应持久度的选择。转染后,siRNA在细胞分裂时降解或稀释,一般只持续5天或6天,马萨诸塞州医科大学的助理教授Abraham Brass说道。这个时间应该是足够用来干扰细胞进程,例如细胞周期控制、细胞凋亡和病毒复制。但是,研究较长的细胞过程需要更持久的沉默效应,如衰老和分化,这可能需要几星期的时间才能完成。shRNA可以无限期产生稳态水平的siRNA,因为shRNA通常依赖于逆转录病毒的复制扩增,但这一过程相对较慢。这意味着DNA被整合到细胞基因组中,伴随着细胞分裂继续表达shRNA(虽然病毒经过设计改造,无法传播,但是你仍然需要做好防护工作)。

两种文库的另一个关键区别是对应的筛选方式不同。一个siRNA在一个排列矩阵中进行:研究人员在多孔细胞培养板进行细胞转染,每一个孔中包含一种设计好的siRNA,培养后观察每一个孔中的细胞表型。然而这种方法需要约200384个孔的培养板来对人类全基因组的每一个siRNAs进行筛选,花费较高、工作量较大。

而shRNA可以在一种更简单的筛选方式中运用——shRNA筛选池。这里,将所有的细胞置于约100000种不同的shRNA病毒载体中。所使用的病毒的数量很低,确保在大多数情况下,一个病毒只“占领”一个细胞,从而只能表达一种类型的shRNA,沉默一个相应的基因。但这一方法的先决条件是在混合物中找出那些细胞,开发这项技术的哈佛医学院遗传学教授Stephen Elledge说。如果基因沉默存活细胞 “成长”,或表达特定的荧光蛋白而“发光”,研究人员都可以通过细胞表型对产生沉默效应的细胞进行区分,随后再对包含有shRNA的不同细胞进行测序,找到引起相应表型的shRNAs。

RNAi筛选文库的选择

目前,市面上有许多用于siRNA筛选的商用文库,包括覆盖整个人类和小鼠基因组的文库和目标基因集文库,但是这取决于你拥有什么样的研究条件。一些设备能提供两种不同的siRNA库排列矩阵,siRNA被分别置于不同的孔中进行靶向结合。但是,在单阵列设备中,所有的siRNA在培养板的一个孔中进行靶向结合。后者因为所使用的耗材更少而更高效。

一个好的全基因组文库产品,可以专注于一个较小的基因组合,可以将筛选范围缩小,节省时间与精力。要作shRNA筛选,你可以定制自己所需要的文库,无论是病毒形式还是质粒形式。目前可以购买获得两种类型的文库。

其一是Broad研究所的RNAi Consortium (TRC),由Sigma-Aldrich公司销售。Sigma-Aldrich公司的MISSION LentiPlex,是TRC的制成品,售价在$ 13,000;该公司也经营全基因组文库和小型文库的定制项目,收费在10,000和$ 30,000美元之间。

另一种是Thermo Fisher Scientific销售的shRNA文库,叫做shRNAmir,用途是模拟小RNA(microRNA)在细胞内的表达模式。shRNA-mir文库在消除靶基因方面具有一定的灵活性,可以很容易地开启和关闭。而传统的shRNA文库总是令启动子处于开启状态。因此这种文库的可操作性更强。

筛选结果的验证

“经过siRNA筛选,我们通常不缺乏候选基因,不知道这是好事还是坏事,”NCATS的Martin说。困难的是证明siRNA基因沉默所产生的表型确实是靶基因沉默所致,而非其它意想不到的基因。研究表明,大多数的细胞表型是由于siRNA的脱靶效应所致。为了排除这些干扰,研究者们已经开发设计出了相应统计方案。

一旦排除了干扰,接下来重要的事情就是额外测试3-5个siRNA或shRNA分子对你所设计的目标基因的沉默效应进行验证。如果多个RNAi分子作用于相同的基因能产生相同的表型,这就说明其效果是真实的,而不是脱靶效应。另一个有说服力的验证技术是“救援实验”,这项技术将siRNA和靶基因的其它拷贝同时导入细胞,而这些拷贝本身带有突变,使得siRNA无法与之结合,如果细胞表型的改变是由siRNA沉默引起的,那么这些拷贝可以恢复表型。而倘若彪形变化不是由基因沉默引起,那么表型保持不变。但是这种类型的实验的困难在于siRNA-拮抗基因表达水平高,反而会影响其正常功能,因此许多多研究人员跳过了此验证步骤。

验证的关键还在于如何证明你所沉默的基因参与某一个特定的细胞进程,如产生相关的蛋白产物能与某个细胞途径蛋白发生互作,或者能定位在细胞的某个区域,才是有效的。目前还没有相关的数据库公布RNAi的研究数据,但是你可以到以下地方查一查:PubChem生物分析数据库 (ncbi.nlm.nih.gov/pcassay)和德国海德堡大学基因组RNAi的数据库 (genomernai.dkfz.de/GenomeRNAi)。

了解更多:

Gene Silencing Is Golden

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