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家兔局部实验

2016-01-11 09:49:40 成考报名 来源:http://www.chinazhaokao.com 浏览:

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家兔局部实验篇一:家兔实验

家兔实验性肺水肿实验条件探讨

殷骏1,徐刚1,许蜀闽1,刘福玉1

(1. 重庆市沙坪坝区高滩岩第三军医大学高原军事医学系专管共用实验室,400038) 摘要:目的:家兔实验性肺水肿是病理生理学课程中最经典的实验之一,本实验的目的是探索复制家兔实验性肺水肿动物模型中生理盐水注入速率、生理盐水注入量以及肾上腺素注入量三者之间的最佳条件,明确它们在肺水肿形成过程中的作用。方法:每个变量各设计3个水平,根据正交设计表L934得到9个实验组[1],实验组动物麻醉、插管、输入生理盐水与注入肾上腺素后,观察家兔血压、呼吸、心率与肺系数变化,并听诊湿啰音出现时间。结果:实验组家兔均发生不同程度的肺水肿,实验组过程中动物呈现血压先升高后下降及心率减慢的现象,并出现呼吸抑制的表现,湿啰音在75ml/kg生理盐水注入量、100滴/min速率静滴生理盐水与0.45mg/kg注入肾上腺素实验组出现最快,且与其余组差异显著(P<0.05);湿啰音在50ml/kg生理盐水注入量、10滴/min速率注入生理盐水与0.15mg/kg注入肾上腺素实验组出现最慢,且与其余组差异显著(P<0.05)。结论:成功复制出家兔急性肺水肿最佳模型,对以后学生实验设计有参考价值。

关键词: 肺水肿;正交设计;肾上腺素

ABSTRACT: The experiment of pulmonary edema of rabbit was one of the most classic experiment in the pathophysiology, the aim of research was to explore how fast the velocity of Sodium Chloride was injected and how much Sodium Chloride and adrenaline were injected, and we can knew how these factors bring about pulmonary edema. Every factor was designed three level, According to the tabel L934, we can get nine groups of experiment, Every group of rabbit was anesthetized, then the left vein and right artery and trachea were intubated with plastic vessel, after Sodium Chloride was dripped in left vein with the same velocity, adrenaline was dripped in ear vein with the same velocity, we recorded the blood pressure and the frequency of respiration and heart rate, we calculated the pulmonary coefficient, and we auscultate when wet tympanitic occurred in. Every group of experiment of rabbit all occur pulmonary edema. We find that the blood pressure and heart rate elevated ahead in every group of rabbit. Then the blood pressure and heart rate lowered in every groop of rabbit. When we injected 75ml/kg sodium chloride and dripped sodium chloride with 10ml/min, while we dripped adrenaline with 0.5mg/kg from ear vein, wet tympanitic occurred in the group of rabbit most quickly(P<0.05); When we injected 50ml/kg sodium chloride and dripped sodium chloride with 0.5ml/min, while we dripped adrenaline with 0.15mg/kg from ear vein, wet tympanitic occurred in the group of rabbit most slowly(P<0.05). Key words: pulmonary edema; orthogonal design; adrenaline;

家兔实验性肺水肿病理动物模型的复制是高等医学院校病理生理学实验课最常采用的实验教学内容。目前国内各医学院校常用得是复制家兔急性肺水肿模型,复制该模型的两种常

见方法是油酸注射法与肾上腺素滴注法;由肾上腺素引起的肺水肿模型与油酸组相比,其特点是肺内水肿液形成尤其明显,可见多数动物从口鼻或气管插管的通气孔中流出粉红色泡沫样液体,听诊时肺部啰音显著[1];故各病理生理学实验课较多采用肾上腺素滴注法,但肾上腺素引起的肺水肿模型的缺点是一次滴注后并不出现结果,还需重复滴注,所需时间较长,且在实验过程中生理盐水滴注量与生理盐水滴注速率以及肾上腺素滴注量一直没有个统一的标准[2,3]。本研究通过肾上腺素引起肺水肿模型,观察在不同生理盐水滴注量、不同生理盐水滴注速率与不同肾上腺素滴注量引起家兔肺水肿下,出现肺部啰音与出现粉红色泡沫痰时间的差异;为摸索最优的实验参数提供数据。

1 材料与方法

1.1 仪器与设备

家兔,体重2~3kg;兔手术台、实验动物常用手术器械一套、γ型气管插管、橡皮管、细塑料管、纱布、棉线、注射器(1ml、5ml)及针头各一具、小橡皮块、听诊器、滤纸、婴儿秤、托盘天平、动脉夹、动脉导管、静脉导管、输液装置、中心静脉压计、血压计。 1.2 试剂

3%戊巴比妥钠、1%普鲁卡因、0.9%生理盐水、1%肝素生理盐水、1%肾上腺素溶液。 1.3 方法 1.3.1 动物麻醉

家兔1只,称重后用3%戊巴比妥钠按1ml/kg耳缘静脉麻醉家兔,剪去颈部手术区兔毛,用1%普鲁卡因作局部侵润麻醉。耳缘静脉推注肝素生理盐水(2ml/kg)。 1.3.2 动物插管

颈部正中切口长约4~5cm,钝性分离气管,穿两条线备用;在气管3~4软骨环处剪一T形切口,插入气管插管,用线结扎固定;钝性分离左颈总动脉,结扎远心端,近心端插入带有三通活塞的动脉导管(导管内充满1%肝素生理盐水溶液),结扎固定,接血压计,观察血压值变化;钝性分离右颈外静脉,结扎远心端,近心端插入充满1%肝素生理盐水溶液的静脉导管,结扎固定后与中心静脉压计相连,观察中心静脉压值变化。 1.3.3 复制家兔肺水肿模型

输液前记录血压、呼吸频率与心率。由静脉输入37oC,输液量按50ml/kg、75 ml/kg、100 ml/kg三个水平进行,生理盐水滴注速率按10滴/min、100滴/min、200滴/min三个水平进行,肾上腺素滴注速率按0.15mg/kg、0.3 mg/kg、0.45 mg/kg三个水平进行;滴注肾上腺素后,同时记录血压、呼吸频率、心率与肺部啰音变化;注意当肺部出现水泡音,气管内有泡沫液体溢出时,立即夹住气管,停止输液。其余8组实验家兔按上述方法进行急性肺水肿实验,每组做3个重复;并设一个不输液且不滴注肾上腺素的对照组。

处死动物,开胸,小心取出肺脏,用线在气管分叉处结扎(防止肺水肿液溢出),在结扎线上方剪断气管,摘去心脏及其它结缔组织,用滤纸吸去肺表面的水分称重;计算肺系数,并记录从滴注生理盐水到出现肺水肿所需的时间。

肺系数=肺重量(g)/体重(kg)。 1.4 统计学处理

实验数据以均值±标准差(xs)表示,采用正交设计助手3.1专业版设计正交设计表L934,见表2;采用SPSS10.0统计软件包处理数据,多组数据采用多因素方差分析,多组间两两比较采用q检验,以P<0.05为统计学有显著性差异,P<0.01为统计学有非常显著性差异。

2 结果

2.1 生理盐水量、生理盐水滴注速率与肾上腺素滴注速率不同引起肺水肿各指标观察

各实验组指标间并无显著差异,实验结果见表1。

表1 不同生理盐水滴注量、不同生理盐水滴注速率与不同肾上腺素滴注量引起家兔实验性肺水肿实验记录 因素

血压 (mmHg)

输液前

呼吸频率 (次/分)

心率 (次/分)

对照组 实验组1 实验组2 实验组3 实验组4 实验组5 实验组6 实验组7 实验组8 实验组9

105±1.8 105±1.8 104±1.8 103±1.8 105±1.8 100±1.8 106±1.8 103±1.8 105±1.8 103±1.8

85±2.9 84±2.9 80±2.9 82±2.9 80±2.9 79±2.9 86±2.9 78±2.9 77±2.9 82±2.9

264±6.0 266±6.0 256±6.0 260±6.0 258±6.0 262±6.0 264±6.0 250±6.0 248±6.0 260±6.0

- - - - - - - - - -

106±8.0 140±8.0 138±8.0 135±8.0 145±8.0 158±8.0 152±8.0 156±8.0 148±8.0 142±8.0

83±6.9 112±6.9 106±6.9 107±6.9 110±6.9 125±6.9 123±6.9 118±6.9 108±6.9 113±6.9

260±23 355±23 340±23 341±23 356±23 414±23 378±23 379±23 350±23 358±23

- + + + + + + + + +

肺部啰音

血压(mmHg)

注入肾上腺素后 呼吸频率(次/分)

心率 (次/分)

肺部啰音

注:+表示啰音显著。

2.2 生理盐水量、生理盐水滴注速率与肾上腺素滴注速率不同产生肺水肿的时间差异

湿啰音在75ml/kg生理盐水注入量、100滴/min速率静滴生理盐水与0.45mg/kg注入肾上腺素实验组出现最快,且与其余组差异显著(P<0.05);湿啰音在50ml/kg生理盐水注入量、10滴/min速率注入生理盐水与0.15mg/kg注入肾上腺素实验组出现最慢,且与其余组差异显著(P<0.05)。结果见表2,肺水肿电镜见图1~4。

表2 不同生理盐水滴注量、不同生理盐水滴注速率与不同肾上腺素滴注量引起家兔肺水肿时间观察 因素

体重 (kg)

生理盐水注入量(ml/kg)

生理盐水注入 速率(滴/min)

肾上腺素注入量 (mg/kg)

产生肺水肿时间(min)

对照组 实验组1 实验组2 实验组3 实验组4 实验组5 实验组6 实验组7 实验组8 实验组9

2.0±0.13 2.1±0.13 2.0±0.13 1.9±0.13 2.2±0.13 2.1±0.13 1.8±0.13 2.0±0.13 1.9±0.13 2.2±0.13

0 50 50 50 75 75 75 100 100 100

0 10 100 200 10 100 200 10 100 200

0 0.15 0.30 0.45 0.30 0.45 0.15 0.45 0.15 0.30

0±16.6 61±16.6 47±16.6 45±16.6 50±16.6 36±16.6 52±16.6 44±16.6 53±16.6 44±16.6

b b b b c b bb a

肺系数 (g/kg)

5±3.86 20±3.86 16±3.86 15±3.86 14±3.86 15±3.86 13±3.86 16±3.86 17±3.86 14±3.86

注:表内括号上方标注相同小写字母表示差异不显著(P>0.05);标注不同小写字母表示差异显著 (P<0.05);重复次数n=3。

3 讨论:

肺水肿是由于过多的液体积聚在肺间质和/或肺泡腔内[4];正常情况下,肺组织具有抗水肿特点,肺泡毛细血管的平均血压仅为2mmHg(0.93kPa),不到体循环的1/2;家兔肺中血液与干重比例为5:1,血液动力性变化引起的肺水肿是一个主要的分支,包括了心源性肺水肿和各种血液动力学变化所引起的肺水肿,如低血糖、高压氧与滴注肾上腺素等。

肺水肿对肺功能的影响,在过度输液引起的肺水肿过程中,首先是发生肺充血,继之出现肺间质水肿,然后才发展为肺泡内水肿;在没有肺泡内水肿之前,一般还不至于引起气体叫唤障碍;因为肺充血和肺间质水肿虽然对小支气管有压迫作用,但也能刺激牵张感受器,通过迷走神经反射,引起呼吸加快和通气增加,因而肺泡通气量甚至可以增多,并引起CO2分压下降,氧分压可无明显变化;但到了肺泡内水肿期,则由于小支气管进一步受压迫,肺的顺应性及肺容量下降,气道阻力增加,以及由于水肿液的刺激引起支气管痉挛,可以导致动脉血氧分压下降。

本研究复制了滴注肾上腺素引起血液动力学变化的家兔肺水肿动物模型,首先静脉滴注是为了造成肺毛细血管流体静压高压,如左心衰竭和体内释放的活性物质,如组胺等[4];2、毛细血管和肺泡上皮通透性增高时,血浆白蛋白从毛细血管和微静脉壁滤出,于是毛细血管静脉端和微静脉内的胶体渗透压下降,而组织间液的胶体渗透压上升,促使溶质及水分的滤出,如光气和氯气等;3、血浆胶体渗透压降低,血浆胶体渗透压主要取决于白蛋白的浓度,当血浆白蛋白含量减少时,血浆胶体渗透压下降,导致有效胶体渗透压下降,从而使平均实际滤过压增大,组织液的生成增加;4、肺淋巴回流障碍,由于肺淋巴回流受阻不能代偿地加强回流时,含蛋白质的水肿液就在组织间隙中积聚。

在对比国内先后出版的两本实验教程中,我们发现在生理盐水滴注量、生理盐水滴注速率与肾上腺素滴注量中都存在差异;所以我们认为有必要统一一下实验参数标准,在本次试验中,我们发现实验组5出现肺水肿时间最快(P<0.05),这可能是由于肾上腺素增加了肺泡间隙,并且激活了β-肾上腺素受体与钠离子通道,并且这个反应是可逆的[5];当肾上腺素浓度回到最初水平时,β-肾上腺素受体与钠离子通道也被抑制。

滴注肾上腺素收缩血管后,心室收缩末期与舒张末期室内压力和左房压均升高,使肺静脉血回流受阻而导致肺静脉淤血和肺毛细血管流体静压升高,输液使肺血量增多,也可引起肺毛细血管流体静压升高[6];高浓度的肾上腺素引起血管收缩,肺淋巴回流障碍,再加之滴注一定量的生理盐水能加快家兔进入肺泡内水肿期。

参考文献

[1]李光伟,贾彦等.病理生理学教学中实验性肺水肿复制方法的探讨.journal of Qiqihar Medical College,2000,Vol.21,No.3

[2]王立赞主编.病理生理学实验教程.山东大学出版社,2004,45~47 [3]柳君泽主编.病理生理学实验教程.第四军医大学出版社,2006,76~78 [4]朱学良主编.病理生理学.中国协和医科大学出版社,2004,64~65

[5] Charron PD, Fawley JP, Maron MB. Effect of epinephrine on alveolar liquid clearance in the rat. J Appl Physiol. 1999 Aug;87(2):611-8.

[6]石增立主编.病理生理学.人民军医出版社,2003,39~40

作者简介:

殷骏(第一作者):硕士,重庆市沙坪坝区高滩岩第三军医大学高原军事医学系专管共用实验室,400038。

徐刚:重庆市沙坪坝区高滩岩第三军医大学高原军事医学系专管共用实验室,400038。 许蜀闽:实验师,重庆市沙坪坝区高滩岩第三军医大学高原军事医学系专管共用实验室,400038。

刘福玉(通讯作者):高级实验师,专管公用实验室主任,重庆市沙坪坝区高滩岩第三军医大学高原军事医学系专管共用实验室,400038。

家兔局部实验篇二:局部刺激实验

家兔局部实验篇三:家兔实验常规操作中的点滴经验

第20卷 第4期2003年12月实验动物科学与管理

LABORATORYANIMALSCIENCEANDMANAGEMENTVol.20 No.4December2003

经验・交流

家兔实验常规操作中的点滴经验

张 颖 望文桢

1

2

(11三峡大学医学院,宜昌 443003)(21三峡大学护理学院,宜昌 443000)

摘要:家兔是医学科学研究和教学中应用最广泛的实验动物,实验操作的成败与熟练程度直接影响到研究结果和教学效果。、麻醉效果的判断、手术操作、,。关键词:家兔实验;常规操作;经验

中图分类号:S82911 :B)0420048203

  ,家兔是应用最广泛的实验动物。在家兔的实验中经常要进行各种操作,这些操作的熟练程度直接影响到研究结果和教学效果。作者根据自己数十年的实践,谈一点家兔实验操作的经验和体会。

不好把握。212 穿刺前的准备

在进行耳缘静脉穿刺前,尽量使耳缘静脉充血增粗便于穿刺。可采取如下措施:轻柔或以手指轻

弹待穿刺的血管;拔除待穿刺血管部位的兔毛(剪毛的效果较差);用动脉夹夹住耳缘静脉的近心端。有些人喜用酒精涂擦穿刺部位的血管以刺激血管扩张,但效果多不理想。因为酒精挥发散热使局部降温反而使血管收缩,气温低时尤如此。213 穿刺不能太深

1 家兔的捉拿

经常看见教师和学生抓住兔的耳朵提拿家兔,殊不知这样做不但会损伤兔的耳朵,而且也易引起兔的紧张并激起挣扎和反抗。正确的方法是:一只手迅速抓住兔的颈背部的皮毛,慢慢提起家兔,然后用另一只手轻轻托住臀部,尽量使兔处在舒适、放松的状态。

家兔耳缘静脉表浅,充血时更突出于表面,故穿刺不要太深。由于血管表浅、血管壁薄,针头刺入血管后动一动,可以看见血管中的针头,以判断穿刺是否成功。

214 穿刺后固定兔耳与针头

2 家兔的麻醉

家兔实验常常在麻醉状态下进行,因此麻醉是家兔实验中重要的操作技能。麻醉的方法有多种,如吸入麻醉、腹腔麻醉和静脉麻醉等。教学实验中最常用的是静脉麻醉。211 静脉麻醉进针部位

穿刺成功后立即以左手拇指和食指固定兔耳与针头,并使针管与穿刺血管保持平行状态(若翘起或压低针尖会刺穿血管)兔若挣扎,注意“针随兔动”,右手则推注射器注药。麻醉选用6号或61Π2号的头皮针头为好,使用前检查针头是否通畅、针尖有无倒钩。

215 不可强行按压固定

静脉麻醉通常选择耳缘静脉作注药部位。不管选用何种麻醉药,进针部位宜选择在靠近耳尖部位的血管段,万一穿刺失败,可前移一段再进行穿刺。耳缘静脉近耳根段看似较粗,因位置较深,穿刺时常

收稿日期:2003203204

穿刺、麻醉时家兔往往会挣扎,此时切不可强行按压固定,这样只会引起兔更强烈的挣扎和紧张。此时可让助手顺毛方向轻轻抚摸兔背部,令其安静;也可让助手用两手轻轻蒙住兔的头尾两端,使其前

作者简介:张 颖(1957-),女,吉林省榆树县人,三峡大学医学院实验师,主要从事实验教学与实验室管理工作。

4期张 颖等:家兔实验常规操作中的点滴经验

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后动不得。快速进针可避免或减轻兔的挣扎。

216 家兔麻醉效果的判断

兔对痛刺激不反应或反应不明显、呼吸由急促变为深慢而平稳、角膜反射迟钝或消失、麻醉药注入接近足量等可作为兔已达到理想麻醉效果的综合指征。麻醉注药时应先快后慢,注药过快易导致家兔死亡。

械的应用不太熟悉,尤其是刚从学校毕业的年轻教师。现介绍几种最常用的手术器械:①手术剪:尖弯型剪刀适于剪毛;圆头剪刀适于剪较深处组织,以避免尖端损伤深部组织;作血管、输尿管等微细结构插管时最好选用眼科剪;剪切时要看清楚将要剪切的组织,防止误伤其它结构。②血管钳:家兔实验中止血、牵拉及一般分离等可选用12—14cm的血管钳;作较大范围的分离和较深部位的操作宜选用16—18cm的血管钳;。

3 手术操作

常见有学生和教师做实验时手术部位出血很多,伤的多少有关。,多于白兔,。

311 手术时要尽量避免不必要的组织和血管损伤

4家兔实验中经常需要进行各种插管,如生理实验、药理实验、病生实验等都要用到气管插管、动脉插管、静脉插管、输尿管插管等。

411 气管插管

切开气管时必然会损伤气管壁中的血管而造成出血,如果出血流入气管内,凝固后堵塞呼吸道,会造成家兔窒息。因此插入气管插管后结扎固定时务必要扎紧,肝素化的动物尤其如此。此外若实验中兔出现呼吸困难,可能为呼吸道堵塞所致,应尽快吸出呼吸道内的异物。412 动脉插管动脉插管在急性动物实验中应用较多,如颈总动脉插管和股动脉插管。与狗等大动物相比,兔的动脉细而易破,因此插管的难度较大。动脉插管需注意以下几点:分离出的动脉长度不得小于3cm;选用可靠的动脉夹夹住动脉的近心端;选用锐利的眼科剪剪开动脉管壁约1Π2(不可剪的太多或太少);用弯眼科镊提起剪开的动脉管壁行插管其成功率高。413 多用插管的制作

手术造成损伤是不可避免的,但不论什么手术,

在不影响治疗和实验效果的前提下都要尽量避免不必要的组织损伤。首先必须熟悉手术部位的解剖结构,手术中避免损伤大的血管和神经;除大血管外,肌肉中微血管丰富,损伤后渗血严重且不易止血,因此实验中应尽量避免损伤肌肉。例如机能实验中作家兔的气管插管和分离气管两侧的颈总动脉与迷走神经时,最好从颈部正中切开、分离进入,这样可以避开颈部的肌肉和大血管。如果手术操作中必须经过肌肉深入,最好从肌肉间绕过,尽量避免直接穿过肌肉。312 注意兔的体位

在做上述颈部手术操作时需将兔头和兔体摆正,如果偏斜或扭曲会引起颈部组织器官的位置偏移,增加手术操作的难度;也容易引起初学者对家兔颈部结构辨认和判断的失误。313 手术操作技术要熟练

动物实验的手术操作与人体的手术操作一样,要求实验者的基本操作技术熟练,即切开、分离、止血、结扎、缝合等外科手术的基本功要扎实;切口的位置与大小要正确合适;止血要及时、准确;打结轻快、结扎要牢固。手术过程的每一个操作都要做到轻柔、快捷、准确、稳妥。分离血管和神经时尤其如此,且器械的分离方向与血管、神经的走向一致,并注意不要损伤大血管的细小分支。314 选用合适的手术器械

除外科医师外,大多数医学专业教师对手术器

过去使用的动脉插管由玻璃制成,易破碎、体积大、难固定,使用很不方便。通过在实验中不断摸索,我们自制出一种较为理想的多用插管。制作方法是:取一根一次性输液针头,去掉前端的针尖,将前端剪成斜面状(便于插入血管);在离前端10—15mm处缠几圈胶布用以固定插管,此多用插管就做

好了。此种插管可用于动脉插管、静脉插管,还可用于小肠插管和输尿管插管等。这种多用插管的特点是使用方便,效果好;不会损伤血管和肠管;材料来源容易,制作简单,现已被许多学校广泛采用。

(下转52页)

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实验动物科学与管理

社,19981182—1861

20卷

水肿。14例猪术后尿量正常,推测猪的肝下下腔静

脉有一定的侧枝循环回流,在短期内不致使肾脏发

[4]

生淤血而影响肾脏功能。313 体会

麻醉维持期间,曾1例静滴2%普鲁卡因复合液,术中心率骤降死亡。考虑猪的心脏传导系统对普鲁卡因较敏感,故放弃此麻醉方法,采用氧化亚氮,安氟醚全吸入麻醉,术中辅助呼吸,术后可及时经肺排除体内麻醉药物,使肝衰猪迅速清醒,以避免静脉麻醉药、肌松药等大部分经肝代谢的药物因无法代谢而蓄积体内。

参考[1] 黄洁夫...广州:广东科技出版

[2] 鲁 惠,程 远,封光华,等.猪背驮式肝移植术中血清电解质

的变化及其处理.中华器官移植杂志,2002,23(1):29—301

[3] MoraN,KaptanoglnL,ZhangZ,etal.Singlevsdualvesselporcine

extracorporealliverperfusion.JournalofSurgicalResearch,2002,103:228—2351

[4] StephaneB,RiadS,MarielleB,etal.Areversiblemodelofacute

hepaticfailurebytemporaryhepaticischemiainthepig.JournalofSurgicalResearch,2000,88:63—691

ExperienceofAnesthesiaandManagementin16PigModelsofAcuteHepaticFailure

WANGPing,GUEn2hua

(DepartmentofAnesthesiology,TianjinSecondCentralHospital,Tianjin 300120)

Abstract:Objective Toinvestigatetheanesthesiaandmanagementofpigmodelsduringtheoperationofestablishingacutehepaticfailure.Methods ThepigswereendotrachealintubatedandanesthetizededbyinhalationofEnfluraneandN2O.Results Theintubationofpighaditsowncharacteristics.Thechangesofhemodynamicsdecreasedsignificantlyduringclampingofportalveinandinferiorvenacava.Conclusion Itisfeasibleforpigstobeexecutedintubationwith2outrelaxingmuscles.Thekeyelementsofsuccessfulpigmodelsofacutehepaticfailurearegoodsurgicaltechnologyandmaintenanceofstablehemodynamicsinocculsionphaseofportalveinandinferiorvenacava.Keywords:Pig;Anesthesia;Acutehepaticfailure;Model

(上接49页)

SomeExperienceinTheRoutineOperationofTheRabbitExperiments

ZHANGYing,WANGWen-zhen

1

2

(11MedicalCollege,SanxiaUniversity,Yichang 443003)(21CollegeofTendandProtect,SamxiaUniversity,Yichang 443000)

Abstract:Therabbitisakindofexperimentalanimalusedextensivelyinmedicalresearchandteaching.Weoftencarryonalotofoperationsintherabbits.Successorfailureandmastershipdegreeofexperimentaloperationaffectdirectlytheresearchresultsandteachingeffect.Basingondozensofyears’experience,theauthorsummarizedmanyskillsandexpe2rienceinthecatchingrabbit,intravenousanesthesia,thejudgementofanestheticeffect,surgeryoperation,thechoiceandapplicationofoperatinginstruments,allkindsofintubationsandsoon.Theauthorexpectsthatitwouldbehelpfultothebeginnrs.

Keywords:Rabbitexperiment;Routineoperation;Experience

家兔局部实验篇四:实验八 家兔的热原

家兔局部实验篇五:家兔呼吸运动实验讨论

1、CO2浓度增加使呼吸运动加强

CO2是调节呼吸运动最重要的生理性因素,它不但对呼吸有很强的刺激作用,并且是维持延髓呼吸中枢正常兴奋活动所必须的。每当动脉血中PCO2增高时呼吸加深加快,肺通气量增大,并可在一分钟左右达到高峰。由于吸入气中CO2浓度增加,血液中PCO2增加,CO2透过血脑屏障使脑脊液中CO2浓度增多,

CO2十H2O→

-←H2CO3 HCO3 +H+ CO2通过它产生的+H刺激延髓化学感受

器,间接作用于呼吸中枢,通过呼吸机的作用使呼吸运动加强,此外,当PCO2增高时,还刺激主动脉体和颈动脉体的外周化学感受器,反射性地使呼吸加深加快。

2、吸人纯氮气使呼吸运动增加

吸人纯氮气时,因吸人气中缺O2,肺泡气PO2下降,导致动脉血中PO2下降,而PCO2却基本不变(因CO2扩散速度快)随着动脉血中PO2的下降,通过刺激主动脉体和颈动脉体外周化学感受器延髓的呼吸中枢兴奋,隔肌和肋间外肌活动加强,反射性引起呼吸运动增加。

此外,缺O2对呼吸中枢的直接效应是抑制并随缺O2程度的加深而逐渐加强。所以缺O2程度不同,其表现也不一样。在轻度缺O2,通过颈动脉体等的外周化学感受器的传人冲动对呼吸中枢起兴奋作用大于缺O2对呼吸中枢的直接抑制作用而表现为呼吸增强。

3、静脉注人乳酸(血液中H+增高)

静脉注人乳酸后,呼吸运动加深加快。因为乳酸改变了血液PH,提高了血中H浓度。H+是化学感受器的有效刺激物H+可通过刺激外周化学感受器来调节呼吸运动,也可直接刺激中枢化学感受器,但因血中H+不容易透过血脑屏障直接作用于中枢化学感受器,因此,血中H+对中枢化学感受器的直接刺激作用不大,也较缓慢。 +

4、麻醉双侧动脉体后,再吸人CO2和纯N2时,对呼吸运动的影响不同 用普鲁卡因局部浸润麻醉家兔双侧颈动脉体后,开始吸人CO2时仍可引起呼吸运动加深加快,而再吸人纯N2时,呼吸运动基本不变。

当双侧颈动脉体被麻醉后,使外周化学感受器失去作用,外周的化学感受性反射消失。此时,再吸人CO2时,使血中P CO2增高,CO2虽已不能通过外周化学感受器的颈动脉体反射性地加强呼吸运动,但仍可直接刺激中枢化学感受器,兴奋呼吸中枢,使呼吸运动加深加快,肺通气量增加;而吸人N2后,血中PO2

虽然下降但因双侧颈动脉体被麻醉,外周化学感受器已失去感受功能,而缺O2对呼吸中枢的直接作用以是抑制作用。所以,不会再出现反射性地引起呼吸运动加强的变化。

5、切断一侧迷走神经后,由于这一侧迷走神经的神经冲动传递受阻,使得呼吸运动的调节受阻;随后由于迷走神经为混合神经,另一侧迷走神经将起到呼吸调节作用,此时发挥负反馈调节作用,加速吸气和呼气活动的交替。

6、切断双侧颈迷走神经后,动物的呼吸运动呈慢而深的变化

迷走神经中含有肺牵张反射的传人纤维。肺牵张反射中的肺扩张反射(亦称吸气抑制反

射)的生理作用。在于阻止吸气过长过深,促使吸气及时转人呼气,从而加速了吸气和呼气动作的交替,调节呼吸的频率和深度。当切断两侧颈迷走神经后,中断了肺牵张反射的传人通路,肺牵张反射的生理作用被消除,因此呈现出慢而深的呼吸运动,使吸气延长。

7、增大呼吸无效腔对呼吸运动的影响

增加气道长度后家兔呼吸张力增加 ,呼吸频率增加 。增加气道长度等于增加无效腔,增加无效腔使肺泡气体更新率下降,引起血中PCO2、PO2下降,刺激中枢和外周化学感受器引起呼吸运动会加深加快;另外,气道加长使呼吸气道阻力增大,减少了肺泡通气量,反射性呼吸加深加快;增加家兔气道长度可使家兔通气量增加,呼吸频率加快。

8、度冷丁对呼吸运动的影响

主要通过抑制呼吸中枢,降低中枢对CO2的敏感性,而影响呼吸运动。尼可刹米具有直接兴奋延髓呼吸中枢与刺激颈总动脉化学感受器的作用,由度冷丁引起的呼吸抑制能被`尼可刹米对抗,另外度冷丁会降低呼吸中枢对CO2的敏感性而尼可刹米能增加呼吸中枢对CO2的敏感性的影响作用也与度冷丁相反。 -

家兔局部实验篇六:常用实验动物生物学特性及其应用——家兔等动物

家兔局部实验篇七:家兔部分生物学参数

2003年10月第13卷 第5期

中国比较医学杂志

CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVEMEDICINEOctember,2003

Vol.13 No.5

研究报告

湖北封闭群日本大耳白兔部分生物学参数的观察

卢笑丛,唐利军,孙凡中,张金明,戴 涌,余思义,田 辉

1

2

2

2

2

2

2

(11中国科学院武汉植物研究所Π武汉植物园,武汉 430074;21湖北省预防医学科学院实验动物中心,武汉 430074)

  【摘要】 目的 建立湖北封闭群日本大耳白兔生物学数据库,为毒理学实验提供相关的实验动物背景资料。方法 采用物理称重法测定日本大耳白兔体重、脏器重量;自动血球计数仪、半自动生化分析仪测定红细胞数等10项血液有形成分和血红蛋白,以及碱性磷酸酶等10项生化参数。并与国内常用新西兰和北京的大耳白实验兔有关参数进行对比。结果 提供了湖北封闭群日本大耳白兔的体重、脏器重量;RBC,HGB,MCV,MCH,MCHC,

HCT,PLT,MPV,WBC,W2SCRW2LCR,和AST、ALT、ALP、BUN、TP、ALB、GLU、T-BIL、Grea、T-CHO等与安全性评价

有关常用参数。结论 不同品种间的动物生物学特性有差异,即使同一品种而地区不同的封闭群动物,由于环境、饲养方式、营养状态不同,某些生物学特性和血液、生化参数也有差别。因此,为毒理学实验者提供实验家兔时,除提供微生物等级合格证外,还应按实验需求提供有关的生物学参数。

【关键词】 兔;生物学特性

【中图分类号】Q418  【文献标识码】A  【文章编号】167127856(2003)0520284204

StudiesonBiologicalCharactersofHubeiClosedColony

JapaneseWhiteRabbits

LUXiao2cong,TANGLi2jun,SUNFan2zhong,ZHANGjin2ming,DAIYong,YUSi2yi,TIANHui

1

2

2

2

2

2

2

(1.WuhanBotanicalGardenΠWhuanInstituteofBotany,TheChineseAcademyofSciences,Wuhan 430074,China;

2.DepartmentofLaboratoryAnimal,HubeiAcademyofPreventiveMedicine)

【Abstract】 Objective ToestablishthedatabankofbiologicalparametersofHubeiclosedcolonyJapanesewhiterabbits

forprovidingbiomedicaltoxicologyexperimentswithrelativedataoflaboratoryanimal.Methods Therabbitbodyweightandor2ganweightweremeasured.ThesomeofhaematologicalparameterssuchasRBC,HGB,MCV,MCH,MCHC,HCT,PLT,MPV,WBC,W2SCRW2LCRwereexamined.ThebiochemicalparametersofAST,ALT,ALP,BUN,TP,ALB,GLU,T2BIL,Grea,T2CHOweredetected.Thosewerecomparedwiththeparametersofcommonexperimentalrabbits.ResultsandConclusion Alltheabovementionedparameterswereobtained.Thebiologicalcharactersweredifferentamongthedifferentspeciesofrabbits,eveninsamespecies,anddifferentbiologicalcharactersduetodifferentregions,environments,breedstatusesandnutrition.

【Keywords】 Japanesewhiterabbit;Biologicalcharacters

  日本大耳白兔具有耳朵长阔,肤色白,血管清晰

的特点,是我国常用的实验动物品种之一。我国地域辽阔,科研单位分布广泛,所以日本大耳白兔也就分布较广。由于该品种应用于医学生物学、制药工业、生物制品、轻工业与食品工业、农业以及国防和

[基金项目]湖北省科技厅“九五”重点科技发展项目(972P0904)[作者简介]卢笑丛,女(1959-),研究员,研究方向:实验动物

学。

军事等诸多方面的研究,湖北省实验动物研究中心

于1998年从西安引进日本大耳白兔种群,经过近5

1

年以非近亲方式进行4代繁殖生产,已经培育成湖北封闭群日本大耳白兔。由于在安全性评价的亚急性和长期毒性实验中动物的脏器系数、动物体重增长情况及其血液学、血清生化指标都是必须检查的项目,因此,我们选取上述指标进行研究,其目的一是要充实湖北封闭群日本大耳白兔的生物学指标;二是为进行安全性实验的科学家们提供该品种

的背景资料。1 材料和方法1.1 材料

1.1.1 实验动物 湖北省实验动物研究中心生产

的封闭群日本大耳白兔,一级,合格证号为19-072。1.1.2 饲养环境 家兔饲养于家兔繁殖车间的兔笼具中,笼具尺寸为750mm×850mm×60mm,每兔一笼。该车间采用集中顶送风,通过单向流组合式兔笼设备集中排风的方式换气。在送风设备中未使用各级过滤网,所以饲养环境仍属于一级。各项指

2

标均达到GBΠT14925294标准。其中氨浓度为

3

11123mgΠm。1.1.3 饲养方式及营养 每日上午定时饲喂颗粒饲料约150gΠ只,自由饮水。饲料指标达到GBΠ

3

T14924-94要求。饮水符合城市饮用水标准。1.1.4 主要实验仪器 Sysmextmf820型自动血球计数仪;BT2224半自动生化分析仪;TCS2500电子天平。1.2 方法

1.2.1 体重增加与脏器重量测定 随机取7~8周

采2份,一份为全血,做血液学测定;另一份,分离血

清做生化测定。血液使用自动血球计数仪测定,选择红细胞数(RBC)、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、血小板(PLT)、血小板平均体积(MPV)和白细胞(WBC)、中性白细胞(W2SCR)、淋巴细胞(W2LCR)等10项血液有形成分和血红蛋白(HGB)作为观测指标。血清使用半自动生化仪测定,选择与安全性评价有关常用参数,即天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、总胆红素(T2BIL)、肌酐(Grea)、总胆固醇(T2CHO)等10项指标。分别统计测定数据,用t检验比较对雌雄家兔差异。2 结果

2.1 湖北封闭群日本大耳白兔体重的增加 3~4

周龄时家兔体重为0.3~0.31kg,无性别间差异。7~12周龄时雌雄兔间体重差异有显著性(P<0105),见表1。

2.2 湖北封闭群日本大耳白青年兔脏器系数 雌

龄雌雄家兔各18只,每隔1周空腹称重一次。一直

测定到第13~14周龄。另取3~4周龄、5~6周龄的雌雄家兔各10只,进行空腹称重。分别统计雌雄家兔体重指标。在家兔13~14周龄时,称重后放血处死,取心、肝、脾、肺、肾、胸腺,除去附着的组织,使用电子天平称重,并按照gΠkgδ体重计数相对器官重量(也称脏器系数)。分别统计雌雄家兔体重增加、脏器系数的数据,用t检验比较雌雄家兔差异。1.2.2 血液学与血清生化测定 随机取13~14周

雄家兔在13~14周龄时的脏器系数,除心脏外,雄

性家兔脏器系数均略高于雌性家兔(P>0.05)。见表2。2.3 湖北封闭群日本大耳白兔血液指标 雌雄家

12

兔的红细胞为(5.47~6.047)×10ΠL,血红蛋白

9

85132~89124gΠL、白细胞(0.52~0.57)×10ΠL。见表3。214 湖北封闭群日本大耳白兔血清的部分生化指标 13~14周龄的家兔在AST、ALP、BUN、TP4项指标雌雄兔差异有显著性(P<0105)(表4)。

龄的青年雌雄家兔各25只,耳静脉采血。每只家兔

表1 日本大耳白兔体重(kg)

Tab.1 BodyweightofJapanesewhiterabbits(kg)

周龄Age(week)

雄兔Male

n

雌兔Female

最小值Min

0.300.831.381.611.762.13

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