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不吝赐教用法

2016-02-16 09:38:10 成考报名 来源:http://www.chinazhaokao.com 浏览:

导读: 不吝赐教用法篇一《使用得体》 ...

以下是中国招生考试网www.chinazhaokao.com为大家整理的《不吝赐教用法》,希望大家能够喜欢!更多资源请搜索成考报名频道与你分享!

不吝赐教用法篇一
《使用得体》

不吝赐教用法篇二
《spss使用方法》

SAS 8.2的界面中间是三个并排(或层叠)的窗口,那个叫做Program Editor的窗口(窗口标签为Editor)就是用来输入SAS语句的,编程操作的所有内容都是在该窗口内完成的。

(一)数据集(dataset)和库

统计学的操作都是针对数据的,SAS中容纳数据的文件称为数据集,数据集又包含在不同的库(暂且理解为数据库吧)中。SAS中的库分为永久性和临时性两种。顾名思义,存在于永久库中的数据集是永久存在的(只要你不去删除它),临时库中的数据集则在你退出SAS后自动被删除。至于SAS中库的概念,最简单的理解就是一个目录,一个存放数据集的目录。

数据集的结构完全等同于我们一般所理解的数据表,由字段和记录所构成,在统计学中我们习惯将字段称为变量,在后面的内容中字段和变量我们就理解为同一种东西吧!建立数据集的方法很多,编程操作中有专门的数据读入方法来建立数据集,但需要将数据现场录入,费时费力。如果数据量大,我劝各位还是先以其它方法将数据集建好,否则程序语句的绝大部分会浪费在数据的输入上。

(二)SAS程序概述

和其它计算机语言一样,SAS语言(称为SCL语言,SAS Component Language)也有其专有的词汇(即关键字)和语法。关键字、名字、特殊字符和运算符等按照语法规则排列组成SAS语句,而执行完整功能的若干个SAS语句就构成了SAS程序。

SAS程序包括多个步骤和一些控制语句,一般情况下均包括数据步和过程步,一个或多个、数据步或过程步,它们之间任何形式的组合均可成为一段SAS程序,只要能完成一个完整的功能。通常情况下SAS程序还包括一些全程语句,用以控制贯穿整个SAS程序的某些选项、变量或程序运行的环境。

SAS程序的语句一般以关键字开始,以一个分号结束,一条语句可占多行(SAS每看到一个分号,就将其以前、上一个分号以后的所有东东当作一条语句来处理,而不管他们处在多少个不同的行中)。SAS语句对字母的大小写不敏感,你可以根据个人习惯决定字母的大写或小写。

1. 库名(库标记)的定义

为了保存宝贵的数据和方便操作起见,我习惯于指定自己的库名及其路径(目录),因为SAS系统中已有的永久库(SASUSER)无论库名还是其对应的路径都太过繁琐,使用太不方便。程序中用到的数据,都可以永久的保存于该路径下,保证以后可以重复使用。指定库名的语句为全程语句,其格式如下:

Libname 库名 „路径‟;

例如我们指定的库名为“a”,路径为:“e:\data\”,SAS语句如下:

libname a „e:\data\‟;

2. 数据步

SAS的数据步以data语句开始,用于创建和处理数据集。Data语句以关键字“data”开始,格式如下:

data 数据集名;

例如:data a.case; 将创建在库a中名为case的SAS数据集,语句执行后你可在与库a对应的目录下看到刚刚建立的数据集文件case。

Data语句所指定的数据集,一般都是以“库名.数据集名”的格式出现的,也可以单独的“数据集名”出现,此时的数据集系统默认为是临时库中的数据集,退出系统后将会被删除。

data语句有两个重要的功能,标志数据步的开始和命名将要创建的SAS数据集。

除data语句外,数据步一般情况下还包括infile语句、input语句以及datalines语句等。在不同的数据输入方式下对于它们的使用方式也不一样。

SAS程序有两种常见的数据输入方式,即从外部文件读入和直接输入两种方式。

(1)外部文件读入方式

数据若已经包含在某个外部文件(文本文件或数据文件)中,可用此方法输入数据到数据集文件中。

在以上介绍的data语句后,写入以下语句:

infile „外部文件的所在位置及名称‟ 选项;

input 变量名1变量名2 …变量名n;

infile语句用于从外部文件读入数据,必须出现在input语句之前。它的功能是指定一个包含原始数据的外部文件。

input语句用于向系统表明如何读入每一条数据记录。它的主要功能有:读入由语句指定的数据列,为相应的数据域定义变量名,确定变量的读入模式。

例如:

libname a „e:\data\‟;

data a.student;

infile „e:\data\student.txt‟;

input name height weight;

以上程序将目录“e:\data\”下的文本文件“student.txt”中的数据输入数据集student中,该数据集存放于目录“e:\data\”下。

(2)直接输入方式

数据量较少或操作者意志力坚强的情况下采用此种输入方式,在data语句之后写入如下语句:

input变量名1变量名2 …变量名n;

datalines;(在以前的版本下为cards,新版本下两者可通用)

… … … …(数据行)

… … … …(数据行)

… … … …(数据行)

;

datalines语句用于直接输入数据,标志着数据块的开始。

注意:这里的数据行中数据之间以空格分隔,当然也可以其它东东如逗号等来分隔,这里大家先以空格来分隔好了。因为不同的分隔方式下input语句要采取相应的控制选项,这些我们以后再讨论,这里我们还是省省力气吧。另外数据行输完后不能像其它语句那样直接在后面加上分号,而要另起一行输入分号,这样SAS才认为这是在输入原始数据而不是在搞别的什么。

例如:

libname a „e:\data\‟;

data a.student;

input name $ height weight;(name后面的$符号表示变量name为字符型变量)

datalines;

Linda 171 51

Mary 168 50

Selinna 169 49

;

以上程序将直接建立数据集文件student,该数据集文件存放于目录“e:\data\”下。

3. 过程步

SAS程序的过程步表示一个处理过程,如排序、T检验、方差分析等等。过程步以关键字proc开始,后面紧跟着过程名,用以区分不同的程序步,并以关键字run结束。

一般的格式如下:

proc 过程名 选项列表;

……(其它语句);

……(其它语句);

run;

SAS程序中涉及的过程多达数百种,实现统计功能时常用的过程也有数十种之多,现将最为常用的过程名称及其所能实现的功能列入下表(表1.1),以便各位提前热热身。

表1.1 常用的过程名称及其功能

过程名

功 能

Sort

将指定的数据集按指定变量排序

Print

将数据集中的数据列表输出

tabulate

将数据按照指定的分类变量以表格的形式分类汇总

Means

对指定的数值变量进行简单的统计描述

Freq

对指定的分类变量进行简单的统计描述

Ttest

对指定的变量做t检验

Anova

对指定的变量做方差分析

npar1way

对指定的变量做非参数检验

Reg

对指定的变量做回归分析

Corr

对指定的变量做相关分析

Discrim

不吝赐教用法篇三
《2012语言得体课件(用)》

不吝赐教用法篇四
《网络使用手册》

北京林业大学网络使用手册

第五版

北京林业大学信息中心

二零零八年一月

目 录

前 言 ........................................................................................ 1

第一部分 用户服务 .................................................................... 1

校园网用户网络帐号开户指南 .............................................. 1

网络客户端安装使用指南 ...................................................... 8

数字校园门户使用指南 ........................................................ 16

校园网用户IP地址开户指南 .............................................. 19

用户自助IP网络管理系统指南 .......................................... 22

北京林业大学无线网络门户使用指南 ................................ 24

新生开户指南 ........................................................................ 29

第二部分 使用指南及常见问题解答....................................... 31

第三部分 校园网规定 .............................................................. 63

北京林业大学网络用户入网协议 ........................................ 63

北京林业大学信息安全与校园网使用规范管理办法 ................ 66

北京林业大学学生区通网须知 ............................................ 68 PART 5: THE METHODS TO USE CAMPUS LAN FOR

INTERNATIONAL STUDENTS ............................................ 69

前 言

我校自1997年建网以来,共经过三期建设,建成了千兆骨干,百兆交换到桌面,覆盖全校所有教学、科研、办公、图书馆、实验室、学生公寓以及部分家属区的校园网络。并实现了IP地址及流量的集中管理与监控,逐步形成了一个建设水平高,覆盖面积广,管理制度规范,网络资源丰富,运行状况良好的校园网络环境。

为了让广大校园网用户了解我校网络运行方式以及相关管理规定,并旨在解答网络使用过程中的疑问,方便用户使用网络,提高网络使用效率和管理水平,做到有章可循,按章办事,我们汇编了《北京林业大学网络使用手册》。

手册共分为四部分。收编入的文件资料截至二零零七年九月,内容涵盖了从国家政策法规到学校网络管理规定、校园网用户服务指南、病毒防护等方方面面。为了便于查阅,我们按照内容分类对文件进行了分类和集中。力求“全、新、实”,具有较强的实用价值和参考价值。手册将对我校广大教职工、学生合理有效使用网络有很大帮助。随着政策的变化和管理技术上的不断升级,有些文件或文件中的部分规定会逐步修订,若有新文件颁布,均以最新文件规定为准。

由于所编文件内容较多,涉及面较宽,而编纂时间又短,手册中一定存在诸多不足之处,希望读者不吝赐教,以便我们修订、充实,逐步完善《北京林业大学网络使用手册》,充分发挥其在我校网络使用知识普及中的作用。

该手册由信息中心主编,在编辑校审过程中,得到了信息学院第九党支部的大力支持和配合,使得手册内容得以丰富完善。特此感谢!

北京林业大学信息中心编委会

2007-09-05

办公时间以及相关信息

● 业务办理:

(周一至周五) 8:30~11:30,13:30~17:00,18:00~21:00 (周六,周日) 9:00~11:00,14:00~16:00,18:00~20:00 ● 电话咨询:

(周一至周五) 8:00~11:30,13:30~17:00,18:00~21:00 (周六,周日) 9:00~11:00,14:00~16:00,18:00~20:00 ● 节假日办公时间具体参见信息中心发布的通知。

● 客服电话:62338792 / 62338794

● 客服邮箱:service@bjfu.edu.cn

● 注册网址:

● 校园网主页网址:

● 邮件系统网址:

● 数字校园平台:

● 信息中心网址:

-北京林业大学网络使用手册第五版-

第一部分 用户服务

校园网用户网络帐号开户指南

一、上网必需条件:

局域网用户:电脑(586以上)、网卡、网线、处于校园网连接的办公区、教学区、宿舍。

[注]:

1、在校内上网必须申请一个上网帐号,并在通用网络计费系统(站点设置sso信息登录后,即可连接校外网络资源(如下图所示)。

1). 通用网络计费系统

(

1

不吝赐教用法篇五
《语言运用得体练习》

语言运用得体练习

1 、措辞得体的一项是( )

A. 鲁迅先生不幸逝世,噩耗传来,举国震悼。

B. 张老师,我们全班同学都很赏识你的教学方法。

C. 中国政府历来主张,地区间的矛盾应以和平方式加以解决,不能二句话说不到一块儿,就动刀动枪的。

D. 你既然身体欠佳,那你给老师打个电话,请半天假。

2 、从语体风格来看,下列句子中,有一句与其它三句不同,这一句是( )

A. 实行在党的纪律面前人人平等的原则,给违反纪律的党员以应有批评或处分,把坚持反对党、危害党的分子清除出党。

B. 幼儿园的小朋友,从明天起,下午两点钟进幼儿园,每天可以在家里午睡。

C. 一切违反宪法和法律的行为,必须予以追究。

D. 对于确属坚持错误意见和无理要求的人,要给以批评教育。

3 、下列句中加点的惯用词语,使用错误的是( )

A. 给朋友写信,末尾用了“夏安”。

B. 学生给一位刚刚病愈后的老师写的信,最后的致敬语是:敬祝痊安。

C. 有位海外游子给其祖父写的信,落款是:××顿首。

D. 有位长辈给侄儿写信说:“此事望你钧裁。”

4 、语言运用得体的一项是( )

A. 请问您老人家今年多大了 ?

B. 现将先生的大作付梓,以就正于读者。

C. 老先生说得有道理,领教领教 !

D. 如此真心实意,这礼物我只好笑纳了。

5 、下列短信的句子中,加点的词语使用恰当的一句是( )

A. 近悉教躬违和,弟子特此致候

B. 惊闻学兄家慈病逝,特致沉痛哀悼

C. 会期定于五日,勿误,特此见示

D. 已悉,一号广州面商,为荷

6 、下列句子中,加点的传统礼貌用语使用不恰当的一句是( )

A. 阁下访问寒舍,我深感荣幸。

B. 非常感谢贵校师生给我的热情款待。

C. 请留步,足下就此告别。

D. 回到老家,务必代我问候双亲大人。

7 、下列句子中,加点的传统礼貌用语使用正确的一句是( )

A. 咱们分别时你送我的礼物,我一直惠存着。

B. 你的文稿,我已看了,对其中不妥当的几处,我斗胆加以斧正。

C. 大作已拜读,唯几处有疑,特致函垂询。

D. 拙作奉上,自己总觉得惶恐不安,望哂笑之余,不吝赐教。

8 、下列句子中,加点词语使用恰当的一句是( )

A. “三岁四岁狗也嫌。”小点点一会儿爬到床上翻跟头,喊“我是孙悟空”;一会儿又在地上爬,喊“我当解放军,母亲给我买枪”。

B. 洋柿子是一年生或二年生草本植物,全株有软毛,花色黄,结浆果,球形或扁圆形,红或黄色,是营养价值较高的蔬菜。

C. 老村长一进门就说:“张全家的二亩地,秋里收了一千五 ! 咱都得科学种田,都弄它一千五。”

D. “我这法行不行 ? ”李老汉着急地说,“不对,你给雅正,大叔请你喝酒。” 9 、下面两段话中划线的字句,用得不得体的一项是( )

23 日前国际奥委会投票通过悉尼作为 2000 年奥运会会址后,阿根廷奥委会秘书长在接见①本台记者采访②时说,他对北京未能当选不无遗憾③。人们当时确实很难断定北京和悉尼哪个城市能够得主④。他认为,北京及其奥申委为争办做了大量的⑤、出色的⑥、卓有成效⑦的工作。

A. ①④ B. ③⑥ C. ⑦⑧ D. ①⑥

10 、选出语言得体的一项( )

A. 多年不见的老乡捎来了家乡的土产,我推辞不了,最后只好笑纳了。

B. 尽管只是绵薄之力,但他费了很大的劲,我们应该感谢。

C. 我因临时有急事要办,不能光临贵校座谈会,深表歉意。

D. 这种陈词滥调的报告恐怕是没有人愿意恭听的

11 、在下列场合中,服务员的哪句话比较得体?( )

陈亮第一次走进建行营业大厅,不知该走向哪一个窗口存钱,正在犹豫时,在柜台外的服务员见了问:

A. “你要存多少钱,先生?” B. “你想取多少钱,先生?”

C. “我能为您服务吗,先生?” D. “你想干什么?”

12 、李红因家庭经济困难,同意学校保送她上师范大学,师范大学的招生老师考察李红时问她:“有些优秀学生,不愿被推荐上师范院校,你是怕高考落榜呢,还是碍于学校老师的面子,不好推辞呢?还是喜欢教师这一职业呢?”

李红应选下边哪一句话回答,才既得体又诚实。( )

A 、凭我的成绩,考大学应没问题。至于职业,我认为都有其优越的一面。

B 、作为一名高三学生,能被保送上大学是值得骄傲的,我应尊重学校给我的这份光荣。

C 、关于保送我上师范大学的事,学校征求过我的意见,我是经过慎重考虑后才同意的。

D 、都不是,是因为我家庭比较困难,反复权衡,我还是读师范院校合适。 13 、海湾战争前,一中立国外交官与伊拉克外长举行会谈,试图规劝伊拉克撤出被其占领的科威特。下面语句最得体的一句是( )

A 、贵国若不及早撤出,以美国为首的多国部队就获得了大举进攻的借口,所以萨达姆总统应采取灵活策略,暂时放弃科威特,以避开美国的强大攻势。

B 、希望贵国政府切实履行联合国的有关决议,无条件地撤出所占领的科威特领土,以缓和十分紧张的海湾局势。

C 、相信伊拉克政府会正视伊拉克所面临的灾难,量力决策,否则,势必会出现后悔莫及的局面。

D 、希望萨达姆总统从海湾和平和贵国本身的利益出发,争取主动,避免出现大家都不希望看到的局面。

14.下列句子加线词表达得体的一项是( )

A.小王在课后捧读小说。

B.李白的诗歌因袭了前人浪漫主义风格。

C.“小姐,请给我拿一包食盐。”我着急地说。

D.值此联合国教科文组织举行的世界文化政策大会召开之际,我谨代表中国政府向大会致以热烈的祝贺。

15、选出语言得体的一项

A多年不见的老乡捎来了家乡的土产,我推辞不了,最后只好笑纳了。

B尽管只是绵薄之力,但他费了很大的劲,我们应该感谢。

C我因临时有急事要办,不能光临贵校座谈会,深表歉意。

D这种陈词滥调的报告恐怕是没有人愿意恭听的

16.下面是某校准备张贴在大门口的一份通知稿,有三处必须修改,写出这三处的序号。

各位来宾、各位校友:

a今天是我校建校50周年的大喜日子,b感谢大家能在百忙中莅临参加。c为了校庆活动的顺利进行,d各位务必先到接待处签名,e然后领取纪念册。f10点钟到礼堂参加庆祝大会。g会后欢迎您在母校参观。

中学校庆会务组 月 日

答: ______________________________________________________

17.下面是张丰的留言条,请从语言得体角度找出应删改之处。

小王同志:您好!丢失支票,(a)事关重大,使我(b)寝食不安。(c)公司上下也焦灼万分。多亏您(d)高风亮节,(e)及时送回。今天,我(f)于百忙之中(g)专程(h)去致谢,不巧,又未能见面,实在(i)遗憾。我(j)由衷地感谢您,并希望您能(k)再接再厉。略备薄礼,聊表谢意,尚望(l)笑纳。

公司 张丰

年 月 日

18、 阅读下面的材料,根据要求回答问题。

郎平担任美国女排主教练后发现,队员中多数主力的身型都属于“偏胖”,可她们都没有减肥的意思。郎平以前在中国女排当主教练时,碰到这种情况早就“命令”队员严格控制饮食了,可在美国这样会被认为对队员不尊重。

(1)假如郎平要提醒一位叫博格的主力队员减肥,她该怎么说才能委婉而准确地表达自己的要求又不失对队员的尊重呢?字数在40—50之间。

(2)假如这位叫博格的队员不愿意减肥,她又该怎么说才能鲜明地表达自己的意见呢?字数在25—30之间。

19 、假如你获得全国中学生“圣陶杯”作文比赛一等奖,有人向你祝贺,请你根据不同文体要求,作出表示谦虚、上进的回答。

( 1 ) 使人感到亲切而易于接受的日常口语体:

( 2 ) 庄重、严肃的正规口语体:

( 3 ) 含蓄、富有文采的口语体:

20 、一位农村同学家境困难,在一场洪水中住屋倒塌,财物被水冲光,全校师生闻讯后立即主动捐款捐物,帮助该同学渡过难关。

如果你作为师生代表,带了钱物去慰问和鼓励这位同学,该说些什么话,把这几句话写下来。(不超过 50 字)

21 、根据下面提供的情况和要求,写一段得体的话。

甲乙两人同丙一起去公园照相。丙长得很漂亮,就是脖子稍短了些。一次甲给丙照相的时候想采用俯角拍摄,乙小声提醒说“她脖子短,俯拍就更显得脖子短,不如平拍好。”丙听到乙在嘀咕什么,很敏感,找个机会悄悄问甲:“她刚才说我什么?”请问 ,如果你是甲,既要符合乙的大体意思,又不挫伤丙的自尊心,你将如何说? 答:(不超过 20 字)

22 、下面一个故事,出自林语堂的一篇文章:一人将由地狱投生到人间,他对阎王说:“要我做人,须答应我的条件。”他接着说:“我要是宰相儿、状元父。家宅四周一万亩的田地,有鱼池,有果实;一个美丽的妻子,一些妖艳的妾,她们待我很好。要满屋金珠,满仓五谷,满箱银钱,而我自己则要做公卿,一生荣华富贵,活到一百岁。”阎王说:“ 。”

请你设身处地,替阎王说一句话,表明他的要求是绝对办不到的,趁早死了这条心。(不超过 25 字)

25、国民经济发展了,人们生活改善了,消费观念变化了,而奢侈浪费的行为也悄然成了一部分人的“时髦”。请你针对这一现象,拟一条公益广告词。

要求:①立意明确,能起到警醒或劝诫的作用。②用语文明,措辞得体。④不超过25字。

答:

26.日常生活中,讲究措词文雅和形象,是中华民族的优良传统。请参照例句写出下列不同场合中使用的词语和句子。(5分)

比赛夺了冠军,可以直接说“夺冠”;文雅一点,可以说“折桂”“夺魁”;如用四个字,可以说“成为擂主”“传来捷报”;甚至还可用“雄壮的国歌声奏起来了”这样的句子来表达。

决赛输了,可以直接说“失利”,文雅一点,可以说“ ”“ ”;如用四个字,可以说“ ”“ ” “ ”;甚至还可用“冲击冠军的努力付之东流”这样的句子来表达。

比赛平了,可以直接说“战平”;如用四个字,可以说“互交白卷” “ ”“ ” “ ”“ ”。

27、某厂布告栏内贴着如下一则通知,请指出其中不当之处。

定于明天上午召开全体员工大会,传达重要文件,不得无故缺席,请互相转告。 厂办公室

不当之处有 .

28.(2008年高考山东卷)阅读下面材料,根据语境在横线上补写恰当的语句。要求:语意连贯,表达得体,不超过30字。

一位诗人在某学校给学生作有关诗歌创作的学术报告,准备朗诵一首诗时,发现诗作放在了学生的课桌上,于是走下讲台去拿。他在上阶梯教室的台阶时,不小心摔倒了,学生们顿时愣住了,目光一下子都集中到了他身上。

诗人站起来稳住身体,指着台阶对学生们说:“____________________________。”这一机智而又富于哲理的话语,不仅为诗人解除了尴尬,而且赢得了热烈的掌声。

29.下面是一份求职信的正文部分,语言表达方面有多处错误,请找出三处不得体的词语(或短语),加以改正。

我毕业于大学本科计算机专业,是一名有三年工作经验的电脑程序员。得知贵公司招聘人才,我很希望能到贵公司高就。现附上我设计的几段程序,恳请你们慧眼识英雄。不胜感激!

不得体的词_______________________

改正_____________________________

30.湖南长沙公交车司机周泽良的事迹深深感动着我们,如果把周泽良评为“感动中国人物”,请你根据下面的材料,为他拟写颁奖词。要求:内容表述准确得体,语言生动富有文采;不超过60字。

周泽良,湖南长沙一位普通的公交车司机。2008年1月21日,长沙雨雪霏霏,这是长沙被冰雪覆盖的第11天。傍晚6时许,周泽良驾车行驶到长沙市城南路与韶山路交汇处附近时,突然发病。在生命的最后10多分钟,他拼尽力气在冰冻的路面上将车稳稳地停靠在路旁,避免了一场特大交通事故,保住了车上50多名乘客的生命安全,他却倒在了方向盘上,年仅39岁。死时双手紧握方向盘,右脚还死死地踩着刹车。

______________________________

语言的得体专项练习参考答案

1.A ( B. “赏识”用在上对下, C. 应用严肃庄重的书面语体, D. 根据内容,应是家长和孩子对话,就应用口语语体,而“身体欠佳”是书面语体。)

2.B ( B 是口语,其它为政论语体。)

3.D (“钧裁”是对上级或尊长的敬辞。)

4.C ( A “多大了”不合适,应问“高寿”, B “就正于读者”不合适, D “笑纳”用于请别人接受自己的礼物。)

5.A (本题考查用词得体。 B 项,是给同学的唁电,而“家慈”称自己的母亲,可改为“令堂”。 C 项,是告诉对方会期和不要耽误,“见示”是“给我看”之类的意

不吝赐教用法篇六
《oligo使用教程》

oligo软件使用方法介绍

在正式进行引物设计前,我们首先面临的一个任务就是向Oligo程序导入模板序列,根据不同的实验情况,导入模板有三种方法:

1, 直接用键盘输入:

a, 点击file菜单中的New Sequence 浮动命令,或直接点击工具栏中的New Sequence命令,进入序列展示窗口;

b, 此时即可键入DNA序列;

c, 如果需要的话,Oligo提供碱基回放功能,在边键入时边读出碱基,防止输入错误。点击Edit菜单中的“Readback on”即可。

2, 利用复制和粘贴:当我们序列已经作为TXT文件存在或其它oligo不能直接open的文件格式,如word文件格式,这个功能就显得很有用了。在相应文件中复制序列后在序列展示窗口粘贴,oligo会自动去除非碱基字符。当序列输入或粘贴完成后,点击Accept/Discard菜单中的Accept浮动命令,即可进入引物设计模式。

3, 如果序列已经保存为Seq格式或者FASTA,GenBank格式时,oligo就可以直接打开序列文件。

点击File菜单中的“Open”浮动命令,找到所需文件,打开即可。

进入引物设计模式后,oligo一般会弹出三个窗口,分别是6-碱基频率窗口,碱基退火温度窗口,以及序列内部碱基稳定性窗口.其中的退火温度窗是我们引物设计的主窗,其它的两个窗口则在设计过程中起辅助作用,比如6-碱基频率窗口可以使我们很直观地看到所设计引物在相应物种基因组中的出现频率,如果我们的模板是基因组DNA或混合DNA时,该信息就显得有用了,而内部稳定性窗口则可以显示引物的5’端稳定性是否稍高于3’端等。

一,普通引物对的搜索:

以Mouse 4E(cDNA序列)为例。我们的目的是以Mouse 4E(2361 bp)为模板,设计一对引物来扩增出600-800bp长的PCR产物。

1,点击“Search“菜单中的”For Primers and Probes“命令,进入引物搜索对话框;

2,由于我们要设计的是一对PCR引物,因此正、负链的复选框都要选上,同时选上Compatible pairs.

在Oligo默认的状态下,对此引物对的要求有:a,无二聚体;b,3’端高度特异,GC含量有限定,d,去除错误引发引物等。

3,剩下的工作是确定上、下游引物的位置及PCR产物的长度以及引物设计

参数。

①单击:“search Ranges”按钮,弹出“Search Ranges”对话框。输入上游引物的范围:1-2000,下游引物的位置:100-2300;PCR产物的长度600-800bp。

②单击“Paramaters”按钮进入“Search Parameters”对话框,对话框种分三个活页,分别是:不同设定,参数以及更多参数。

③在“普通设定”窗口,为我们提供了对引物非常直观的设定方法,从高到低分六个等级,最后还有一个用户定制选项。

④当我们对引物的各种参数的含义及应该设定多大值并不是特别清楚时,就可以直接设定Very high/High等来完成对引物设计参数的设定。

⑤当我们选中“Automatically Change String”后,Oligo会在引物搜索过程中:如果在高等级设定中无法找到引物对时自动降低一个定级来进行搜索,知道找到引物对。在设计反向PCR引物对时,就选中“Inverse PCR”复选框。 ⑥我们还可以让引物的长度可以改变,以适应设定的Tm值或PE?(Prime Effitions,引发效率)。也可以限定所选引物对的最大数目。

⑦在“Parameters”窗口中,实际上需要我们改动的只有引物的长度,根据试验的要求作相应的改变,如23nt。其他参数就使用Oligo的默认值,一般无需改变。在“More Parameters“窗口中,一般也无需作任何改变,直接用Oligo的默认值。

4,点击“确认”-“Ok”进入搜索窗口,再次单击“OK”后,Oligo自动完成引物对的搜索,并出现一个搜索结果窗口。显示出得到的引物对数目。 5,点击“Ok”,出现“PrimerPairs”窗口,在窗口中列出了7对引物的简单信息,引物位置,产物长度,最佳退火温度及GC含量。单击“Sort”按钮,可以按产物长度,最佳退火温度及GC含量从小到大或从大到小的顺序排列。 6,点击任意一对引物,在旁边马上弹出一个叫“PCR”的窗口,在窗口中我们可以看到这对引物在模板中的大概位置,最佳退火温度(该温度可以直接应用于我们实际PCR中的第二步退火)。另外还有引物的Tm值,GC含量,引发效率,同时还计算出了产物的Tm值于引物Tm值的差异以及引物间Tm值的差异。一般我们尽量保持前者在20度以内,后者在5-6度以内。点击不同的引物对时,PCR窗口内容同时作相应的改变。

7,要想了解引物的详细信息,如二聚体,发卡结构形成情况、组成、Tm值和错误引发位点等,这时只需点击“Analyze”菜单中的相应命令,就可以分别得到相关信息。例如点击“Duplex formation”,我们就可以得到上游引物间,下游引物间及上下游引物间形成二聚体的情况。同理,“Hairpin formation”,

“Composition and Tm”,“False Priming Sites”等命令就可以显示出相关信息。所有这些分析的结果都有助于我们从Oligo搜索得到的多对引物中选择最佳的引物对。

需要说明的是,1,如果一次搜索得到的引物对太多时,我们可以适当提高选定的条件和规定更合适的搜索范围来减少引物对数;2,引物一般尽量不要在3’端或是离3’端太近的位置形成二聚体,同时二聚体的自有能绝对值尽量小于10;3,对于错误引发,在普通PCR中,如果引发效率在160 points以上时,就可能出现杂带,在测序反应中,错误引发效率则应该严格控制在120 points以下。

8,Oligo中每对引物的详细信息可以直接导出为一个文本文件:

首先点击“File”菜单中的“Print/Save Options”,在出现的对话框中的普通设定选中“Selected”;在“Analyze I”中选择需要保存的信息,在“Analyze II”中选中PCR。)oSAF?

单击确定按钮退出,这时再次点击“File”菜单,Save浮动命令中的“Data Save as”,选择路径及文件名即可。

二,测序引物的设计:

在oligo中,测序引物设计过程与普通引物设计大部分都很相似。

还是以Mouse 4E为例,假如我们要在600-800bp的位置设计一条测序引物。 Open-Searchr

在“Search”窗口中,选中“Sequece Primer”,同时去除负链Search的选中

在“Search Range”窗口,输入正链的600-800bp

在“Parameters”中选定 very high ,引物长度改为18bp

结果得到11条测序引物,与普通引物同理,根据其详细信息就可以挑选到一条最佳的测序引物。

三,探针的设计:

探针的设计与测序引物设计基本相同,只需使“Search”窗口的探针设计选中,改变探针的长度就可以。

四,评估引物对:

我们在各种文献中查到的引物,如果直接进行PCR,往往很难重复别人的实验结果。这时就想到,是不是引物的质量有问题?能不能用软件来对这些问题引物进行一些分析呢?答案时肯定的。

1,点击File菜单中的New命令;

2,在“Edit New Sequence”的窗口中用键盘输入上游引物;

3,如果该引物的首位置不是1的话,可以在“Edit”窗口中输入新的5’端位置数字,如20;

4,点击Accept/Discard菜单的Accept命令;

5,如果引物序列长度不同于当前的引物的话,可以从“Change”菜单中改变当前的引物长度;

6,选取当前序列为上游引物(点击“upper”按钮);

7,从Edit菜单中选取“Lower Primer”命令,在Edit Lower窗口中输入下游引物的序列;

8,在Edit窗口的上角处,输入相应的5’位置;

9,选取“Accept and Quit”命令;

如果想让程序给出最佳退火温度,在此时的对话框中输入PCR产物的长度以及GC含量所占百分比,一般哺乳动物的cDNA序列中GC大约占44%。 10,点击OK就可以在“Analyze”菜单中完成各种分析了。

心得

yvette wrote:

对于作PCR的来说,最难的莫过于设计引物了,理论现在已经很多了,但是真正实践起来是要付出一定的心智的,记得曾经看到某一位主任说他设计了上千对引物,从没有失手的时候,真是让我佩服得五体投地。

最近看了一下OLIGO6.0的使用说明,英文的,感觉有很多地方还是讲得不很明白,比如 Nested primers design 及 multiplex PCR Primer design. 下面我先来讲讲普通的利用OLIGO 设计引物的方法吧:

1 从文件菜单打开模板序列,当然,不是随便什么序列都可以打开的,要有特定的格式,一般扩展名为 *.seq的序列可以直接打开,或者就从文件菜单选择new sequence打开一个空窗口,然后利用复制/粘贴也可以导入模板序列,或者直接在该窗口中写,然后要打开文件菜单旁边的 accept 菜单,选accept就可以了;这时候有三个窗口,重叠在一起,很不方便看,可以从window菜单选Tile,这样,三个窗口就平行排列了。

2 从search菜单选primers and probes,打开了引物搜索窗

3 点黑PCR下面的compatible pairs 前面的小圆孔

4 在oligonucleotide with GC clamp 及 Eliminate false priming 前的小方格里打上勾

5 如果在PCR中可能存在其他的模板,要想使所设计的引物与该模板不会形成错配,可在 And continue above search in other files 的条目前方格中打勾,这时会出现一个新的 select files窗,导入可能会形成错配的模板序列。点OK 6 点Search ranges按钮,输入你想要的上游和下游引物在模板序列上的区间及想要的产物的长度,点OK

7 点parameters 即引物参数按钮,一般将搜索严谨性设为high,如果搜不到,再降低严谨性,另外,在adjust length to match Tm's前的方格中打勾。

点OK

8 点击OK开始自动搜索

9 搜索完成后,在search status窗口的下部选show:primer primers, 点OK 10 得到的引物可以根据位置、长度、退火温度及GC含量进行排序(sort) 11 点击您所想要的就打开了一个窗口显示引物的位置、退货温度、GC含量、PE(Priming efficiency 引发效率)等。

12 从文件菜单点击"New Database" ,然后从import菜单点击 upper primer 和lower primer 就可以将您所需要的上下游引物序列导入到数据库中,至于如何生成引物报告单我就不甚了了,感觉这个功能不如primer premier好使。还希望知道如何使用的兄弟不吝赐教一下叻。

Nested Primer pairs Search

与上述自动搜索差不多,有一下几点不同:

1 打开search菜单后,不要选定 “ And continue above search in other files ” 2 打开parameters菜单后,注意不要选定“ Inverse PCR” 框 ,同样选定“adjust length to match Tm's” 框

3 开始搜索后得到结果显示在“Primer pairs"窗口中,从analyze菜单中 选定multiplexing,得到一个显示所有搜索到的引物在模板上的位置的窗口,直接在该窗口中选择您所要的引物,在您所要的引物的小方块上点击一下,positive strand primer 选定后就从红色变成了绿色,negative strand primer 选定后就从蓝色变成了绿色。先选择巢式PCR的一对外引物,然后选择一对内引物,选定后点击pairs就打开了显示您所选定引物的窗口

4 从文件菜单点击"New Database" ,然后从import菜单点击multiplexed primers就将您所选定的引物导入到一个数据库中,保存。

好像从export 菜单可以生成order form, 但是我实在是太木了,这都大功告成了,到了最后又歇菜了。

还有很重要的功能如搜寻 consensus primer pair 和搜寻 unique primer pair 来扩增同源性的模板,比如后一个应该就是设计扩增许多同源性很高的序列的保守区吧,我以为我已经找到了尚方宝剑了,可是三条序列试了一下,这三条序列经过 multiple align后有很长一段是保守的,您猜怎么着,等了好几分钟,结果没有找到,我又用十条序列,干脆就死机了,可能这一功能需要很大的内存才能使用。也许是我还没有找到窍门,有知道的还请教教我。

多谢了!!!

不吝赐教用法篇七
《常用谦敬词语分类及用法概述》

常用谦敬词语分类及用法概述(一)

对人尊敬,对己谦恭,这是中华民族由来已久的礼仪。敬称,是用以称呼对方或与对方有关的人或事物,以表示敬重;谦称,是对人称呼自己或与自己有关的人或事,以表谦恭。 “家大舍小令外人”是对谦敬词语的最好概括,即在别人面前称自己的长辈和年长的平辈时冠以“家”字,如“家父”“家兄”;在别人面前称比自己小的家人时则冠以“舍”字,如“舍弟”“舍侄”;称别人家中的人则冠以“令”字表示敬重,如“令堂”“令尊”。

在谦称中,除“家”“舍”二字外,还常用“愚”“贱”“拙”“敝”“寒”“小”等谦辞。 在敬称中,除“令”字外,还常用“尊”“贵”“贤”“高”“大”“玉”“宝”等敬辞。 在使用谦敬语时,要注意两点:一是要尊重对方,二是要注意分寸。

我们在平时要注意积累、辨识、牢记一些常用的谦辞和敬辞,才能在运用时得心应手,言随意遣。

一、常用谦辞

1、“家”。用于对别人称自己的长辈和年长的亲戚。如“家父”“家尊”“家严”“家君”(称父亲),“家母”“家慈”(称母亲),“家兄”、“家姐”“家姊”(称哥、姐),家叔(称叔叔)、家累(称自己的眷属)等。

2、“舍”。用于对别人称比自己辈分低或年纪小的亲戚。如“舍弟”(弟弟)、“舍妹”(妹妹)、“舍侄”(侄儿)、“舍亲”(亲戚)等。

3、“小”。称自己和与自己有关的人或事物。如“小弟”(男性在朋友或熟人之间自称)、“小儿”“小顽”“小犬”(称自己的儿子)、“小女”(称自己的女儿)、“小人”(地位低的人自称)、“小生”(青年读书人自称,多见于早期白话,今已不用)、“小可”(自称)、“小店”“小肆”(称自己的店铺)、“小照”(称自己的照片)等。

4、“老”。称自己或与自己有关的事物。如“老粗”(称自己没文化)、“老朽”(老年人自称)、“老脸”(老年人指自己的面子)、“老身”(老年妇女自称)等。

5、“敢”。表冒昧地请求别人。如“敢问”(问对方问题)、“敢请”(请求对方做某事)、“敢烦”(麻烦对方做某事)等。

6、“拙”。对别人称自己的东西。如“拙笔”(称自己的文字或书画)、“拙著”“拙作”(称自己的文章)、“拙见”(称自己的见解)、“拙荆”(称自己的妻子)等。

7、“敝”。称自己或与自己有关的事物。如“敝人”(自称)、“敝姓”(称自己的姓)、“敝处”“敝舍”(称自己的房屋、住处)、“敝眷”(称自己的家眷)、“敝校”(称自己的所在学校)等。

8、“鄙”。称自己或与自己有关的事物。如“鄙人”(自称)、“鄙意”(称自己的意见)、“鄙见”(称自己的见解)等。

9、“薄”。称自己的事物。如“薄技”(称自己的技艺)、“薄酒”(待客时的谦词)、“薄礼”(称自己送的礼物)、“薄面”(为人求情时称自己的情面)等。

10、“贱”。称与自己有关的人或事物。如“贱姓”(称自己的姓)、“贱内”“贱息”(对别人称自己的妻子、儿子,多见于早期白话)、“贱事”(称自己的私事)、“贱躯”(称自己的身体)、“贱恙”(称自己的疾病)等。

11、“忝”。表辱没他人,自己有愧。如“忝列”(说自己有愧被列入或处在其中)、“忝在”(说自己有愧处在其中)、“忝任”(说自己有愧地担任)等。

12、其他:寒舍(谦称自己的家)、“犬子”“犬女”(称自己的儿子、女儿)、寒族(称自己的家族)、寒舍(称自己的房屋)、愚意(称自己的意见)等。

13、称呼:王侯——孤、寡人;大臣——臣;一般人——仆、不才、不佞、愚等;女子——妾、奴婢;晚辈——小子。

一、敬辞

不吝赐教:敬辞,用于自己向别人征求意见或

请教问题。

大材小用:把大的材料用在小处。比喻才能很

高的人屈就于低下职位,不能充分发挥其才能。

鼎力相助:敬辞,大力相助(表示请托或感谢

时用)。

高朋满座:高贵的朋友坐满了席位。形容宾客很多

高抬贵手:客套话,多用于请求对方饶恕或通

融。

率先垂范:带头给下级或晚辈作示范。

洗耳恭听:洗清耳朵,恭敬地听讲。形容恭敬

而认真地听人讲话。(多用于请人讲话时说的客气

话)。

虚怀若谷:谦虚的胸怀像山谷一样空旷深广。

形容非常谦虚。

虚左以待:虚,空着;左,古时以左位为尊。

空着左边的位置等待客人,表示尊敬。也泛指留出

位置恭候他人。

二、谦辞

1、爱莫能助。出自《诗经·大雅》:“维仲山甫举之,爱莫能助。”本指可惜呀,没有谁能帮助你呀。后来转而表示虽然对他人十分同情,却由于能力或条件所限而无法帮助。如,您邀我合资经商,我理当从命,但我财力有限,实在爱莫能助。

2、百身莫赎。即使使用自己一百次生命,也无法抵消或赎回这一过错或遗憾。如,父母相继去世,儿女们心中的遗憾百身莫赎。

班门弄斧:班,指古代的巧匠鲁班。在鲁班门前耍弄斧头。比喻在行家面前卖弄本领。

3、报乏琼瑶。出自《诗经·卫风·木瓜》:“投我以木桃,报之以琼瑶。”意思为,想要报答却又缺少有价值的东西。如,您对我恩深似海,可我报乏琼瑶,深感愧疚。

笨鸟先飞:表示自己能力差,恐怕落后,比别人先行一步。

4、敝帚自珍。本指自己的破扫帚当作宝贝一样爱惜,喻指自己的东西虽然不好,却很珍爱。如,我所写的拙作多有粗疏,然敝帚自珍,还想再行修改,以求长进。

避让贤路:交印辞职,给才德高的人让路。常作老年引退的自谦辞。

5、不材之木。本指不能成材的树木,常用作自谦之词,用来指自己才能平庸。如,对您的厚爱,我深表感谢,但我是不材之木,恐怕有负先生的厚望。

不情之请:客套话,不合情理的请求(向人求助时称自己的请求)。

6、不足挂齿。“不足”即不值得,“挂齿”即放在嘴上讲。意思是不值得一提。如,这区区小事,实在不足挂齿。

7、才疏学浅。才识不够深广,学问实在浅薄。如,我实在是才疏学浅,自愧不如呀!

8、诚惶诚恐。原为敬辞,是封建时代奏章中的用语,表示对皇帝既忠诚虔敬,又惶恐不安。后用来谦称自己做事有诸多忧虑,非常谨慎。如,我自从任职以来,诚惶诚恐,生怕有愧于大家。

德薄才疏:薄,浅;疏,空虚。品行和才能都很差。

德薄能鲜:德行浅薄,才能低下。

9、地主之谊。“地主”指当地的主人,“谊”是“义”的通家上。即“责任、义务”的意思。指招待客人,这是当地的主人应尽的义务与责任。如,欢迎高贵的客人来到我们这里,我一定尽地主之谊。

雕虫小技:比喻微不足道的技能(多指文字技巧)。

东涂西抹:本指妇女涂脂抹粉。后常用作提笔作画、写字或作文的谦辞。

绠短汲深:绠,打水用的绳子;汲,从下往上打水。吊桶的绳子很短,却要从深井里打水。比喻能力微薄,任务重大。

恭敬不如从命:与其态度谦逊有礼,不如遵从人家的意见。

姑妄言之:姑且说说(对于自己不能深信不疑的事情,说给别人时常用此语以示保留)。 挂一漏万:挂,列举;漏,遗漏。提到一个,漏掉上万。形容列举到的很少,遗漏掉的很多,很不完备。

20、管窥蠡测。出自《汉书·东方朔传·答客难》:“以管窥天,以蠡测海,以莛撞钟,岂能通其条贯,考其文理,发其音声哉?”“管”指竹管,“窥”,即看的意思,“蠡”指用贝壳做得瓢或瓠瓢,“蠡测”是指用瓢来舀测海水,本意是指从竹管中看天,用瓢来测量海水,用来喻指眼界狭小,见识浅短,对事物了解片面,认识浅薄。如,我才疏学浅,在此妄发议论,难免管窥蠡测。

⑵狗尾续貂:比喻拿不好的东西接在好的东西的后面,通常只用在自己的作品,表示谦虚。 敬谢不敏:敬,恭敬;谢,推辞;不敏,不聪

明,没有才能。指恭敬地表示没有能力或不能接受

(表示推辞做某事的客气话)。

10、硁硁之见。出自《论语·子路》:“言必行,行必果。硁硁然,小人哉!”意为粗鄙浅薄的见解。用作自谦,形容粗鄙浅薄的意思。如,我的硁硁之见,恐见笑于大方之家。

11、滥竽齐门(滥竽充数)。出自《韩非子·内储说》中滥竽充数的故事,后用作自谦之词。指本无才能却占据其位。如,我才疏学浅,与大家一起共事,真是滥竽齐门。 聊表寸心:聊,略微;寸心,微薄的心意。略微表示一下心意。

12、命途多舛。“命”即命运,“途”指经历,“舛”为背离、不一致之意。指命运和经历常与自己的主观愿望背离、不一致。常用作叙述自己遭遇时的谦辞。如,我这些年来时运不济,命途多舛。如,他近年来时运不济,命途多舛。

13、驽马铅刀。“驽马”指劣马,“铅刀”指用铅做的刀,铅的硬度很低,铅刀无法锋利。借以比喻能力微薄,才识平庸。如,我才微学浅,驽马铅刀,恐不能担此重任。

14、抛砖引玉。表面意是自己拿出来展示的只是一块砖,而引起对方拿出展示的却是一块美玉。借以比喻自己用粗浅的、不成熟的意见引出别人高明的、成熟的意见。如,我先谈一下自己的拙见,就算是抛砖引玉吧。

蓬荜生辉:用以称谢别人来到自己家里或称谢

别人题赠的字画送到自己家里。蓬筚:即“蓬门荜

户”的简称,用蓬草、荆竹作门的草屋比喻穷苦人

家。

区区此心:区区,微小、微薄。形容微不足道的一点心意或想法。

15、犬马之养。出自《论语·为政》:“今之孝者,是谓能养。至于犬马,皆能有养;不敬,何以别乎?”后人将“犬马之养”用为供养父母的谦辞,指自己供养父母做得不太好。如,我无能,犬马之养不能尽意,实在惭愧。

16、容膝之安。出自陶渊明的《归去来兮辞》:“倚南窗以寄傲,审容膝之易安。”本指可以立足的安身之地,常用来谦称自己的居处狭小。如,我退休之后在一小城,虽无豪华居处,

但有容膝之安,因此感到满足。

尸位素餐:尸位,空占职位不做事;素餐,白吃饭。谦称自己未尽职责。

17、率尔操觚。“率尔”是不经意、随便的意思,“操”是持、拿的意思,“觚” 是古代写字用的木版(木简)。本意是褒义的夸奖之词,指随手拿起一块木简就可以写出好文辞,形容作者文思敏捷。后来又演变为一个贬损之辞,常指轻率下笔、草率成文。多用此意为自谦。如,我的这篇拙作,率尔操觚,不成体统,望您不吝斧正。

忝列门墙:忝,表示辱没他人,自己有愧。表

示自己愧在师门。

望尘莫及:同对方相比,差之甚远。

无功受禄:没有功劳而得到报酬。

信笔涂鸦:形容字写得很坏。

18、心颜无措。“心颜”指心情与脸色,“无措”指无处放置、不自然。意思是由于惭愧而感到心理上放不下,脸色上不自然。如,您过奖了,我理当尽力而为,您如此厚爱我,真让我心颜无措。

贻笑大方:贻,留给;大方,指见识广博或有

专长的人。指让学者或行家笑话。

一得之愚:一得,一点心得;愚,愚见,谦辞。谦称自己的一点愚昧的见识。 一孔之见:比喻狭隘片面的见解。

一枝之栖:只求得到一个藏身的地方,是自谦不存奢望的求职用语。

愚者千虑,必有一得:愚笨的人多次思虑问题,也会有一次是正确的,得到一定的收获。也作“愚者一得”。

不吝赐教用法篇八
《正确使用词语》

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