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炙桑皮与蜜桑皮篇一
《蜜炙桑白皮总黄酮的含量测定方法》
第7卷第6期2011年6月
亚太传统医药
Asia-PacincTraditionaJMedicine
V01.7No.6Jun.20ll
蜜炙桑白皮总黄酮的含量测定方法
杨方明1,韦史利2,邬文力1
(1.广州中一药业有限公司,广东广州510530;2.广州中医药大学新药中心,广东广州510405)
摘
要:目的:建立蜜炙桑白皮中总黄酮含量测定方法。方法:以芦丁为标准品,采用紫外分光光度法测
374~O.050
定蜜炙桑白皮中总黄酮的含量。结果:芦丁在0.008246mg/mL范围内线性关系良好,芦
丁标准品溶液浓度C(mg/mL)与.吸光度值(A)的方程为Y=11.76X—O.0061(相关系数r=O.999),总
黄酮平均回收率为99.2%,蜜炙桑白皮中总黄酮的含量为1.26%。结论:紫外分光光度法测定蜜炙桑
白皮中总黄酮的含量简便、快速、准确、灵敏,可作为蜜炙桑白皮中总黄酮的含量测定方法。关键词:蜜炙桑白皮;总黄酮;含量测定中图分类号:R927.2
Assay
文献标识码:A文章编号:1673—2197(2011)06—0022一02
MethodofTotaJFJaVonoidsin
Yang
Cort麟MoriProc船sed
Shi
wjthHoney
Fangmin91,Wei
li2,WuWen
lil
(1.GuanzhouZhongyiPharmaceuticalCompanyLimited,Guangzhou510530,China;2.GuangzhouHipowerPharmaceuticalR&DCo,Ltd,Guangzhou510623,China)
Abst仡ct:objective:To
as
establishtheassaymethodoftotalflavonoidsinC0rtexMoriprocessedwithHoney.Methods:useRutin
standard。assaytotalflavonoidsinCbrtexTⅥoriprocessedwithhoneybyUVspectrophotometry.ResuIts:RutinshowedagoodlinearrelationshipintherangeofO.008374~O.050246mg/mL,theequationofconcentrationC(mg/mL)ofRutinstandardsolutionandabsorbance(A)isY=11.76X—O.0061(r一0.999),averagerecoveryoftotalflavonoidsis99.2%,andthe
content
oftotalfIa—
vonoidsinCortexMoriProcessedwithhoneyis1.26%.Conclusion:UVspectrophotometryissimple.rapid,accurateandsensitiveinassayingtotalflavonoidsinCortexMo“processedwithhoney,s0thismethodcanbeusedastheassaymethodoftotalflaVonoids
inCortex
Moripmcessedwithhoney.
L.ProcessedwithHoneyITotaInavonoids;Assaymethod
Key
WOrds:MDr“sAfk
桑白皮为桑科植物桑Mbr“5口肪口L.的干燥根皮,性甘、寒,归肺经。能泻肺平喘,利水消肿n】。主产于河南、安徽、浙江等地Ⅲ。蜜炙桑白皮是取桑白皮丝片。用炼蜜拌匀,稍闷,以文火炒至金黄色不粘手时,取出摊凉。蜜炙后缓和寒泻之性。增强润肺止咳功效。
2方法与结果
2.1
色谱分析
取芦丁对照品溶液lO肛L和蜜炙桑白皮提取液lO弘L,
分别注入液相色谱仪.以同样的方法进行分析,记录色谱
图.如图1。由图可知,在lO.5~11.5min处芦丁对照品液
1材料、仪器与试剂
1.1
仪器
和蜜炙桑白皮提取液有同样的峰,说明蜜炙桑白皮中含有芦丁成分。
2.2测定方法
2.2.1
岛津CBM一10AVPplus高效液相色谱仪,紫外检测器(VWD)LCSoIutionIite色谱工作站;岛津AUYl20分析天平;Thermo
electron
芦丁对照品溶液的制备
corporation紫外分光光度计;
KQ3200DE型医用数控超声仪。
1.2试药
称取芦丁对照品约25mg。精密称定,置50mL量瓶中,加乙醇适量,超声使溶解,放冷,加乙醇至刻度,摇匀,精密量取10mL,置25mL量瓶中,加水至刻度。摇匀,即得。每
1mL含芦丁0.209
36mg。
乙腈为色谱纯(Merck,Gemany),水为超纯水。其他试
剂均为分析纯。蜜炙桑白皮饮片,经广州中一药业有限公
2.2.2供试品溶液的制备
取蜜炙桑自皮饮片粗粉约O.79,精密称定.置具塞锥形瓶中。精密加入50%乙醇50mL,称定重量,超声处理
司邬文力工程师鉴定,为桑科植物桑Mb旭s口加L.干燥根
皮的蜜炙品。
收稿日期:2011.04.09
作者简介:杨方明(1980一),男,项士研究生,研究方向为中药新药研究与开发。
一22—万方数据
90min.放至室温后,加50%乙醇补重,滤过,即得‘3。”。
O.O2.55.O
’7.5IOO
12515Ol7.5min
圈l芦丁对照品溶液A和蜜炙桑白皮
提取液BHPLC色谱
2.2.3
显色反应
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液适量,置10mL量瓶中,按“2.3”项下显色操作,以相应试剂为空白,照紫外一可见分光光度法在200~700nm范围内进行扫描。扫描结果见图2。
0
世0簧O擎0
00
400
450
500
550
600650700
波长(nm)
圈2芦丁对照品溶液(左)和童炙桑白皮乙醇
提取液(右)显色后紫外扫描
2.3标准曲线的制作
精密量取芦丁对照品溶液0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2.omL、2.4mL,分别置于10mL容量瓶中。加水适量,加5%NaN0:溶液o.4mL,摇匀.放置6min;加10%Al(N03),溶液0.4mL,摇匀。放置6minI加氢氧化钠试液4.omL。再加水至刻度,摇匀。放置15min,以相应试剂为空白.在500nm波长处测定吸光度。以芦丁对照品溶液的浓度为横坐标.以在500nm下测得不同浓度的芦丁标准品的吸光值为纵坐标,绘制标准曲线,见图3。
裹l
线性关系考察结果
2
毯l
蓍一
0O
渡K(nm)
圈3芦丁对照品的标准曲线
对数据进行线性回归得芦丁标准品浓度C(mg/mL)与吸光值(A)的方程:Y=11.76X—O.0061(相关系数r=O.999)。结果表明.芦丁在O.008374~O.050246mg/mL范围内线性关系良好。
万方数据
3方法学考察
3.1稳定性试验
取同一份供试品溶液,按样品测定法操作,分别于Omin、10min、20min、30min、40min和60min,测定RSD=O.23%,表明供试品溶液在60min内测定稳定,结果见表2。
表2总黄酮含量测定稳定性试验结果
(n=6)
3.2精密度
3.2.1
重复性实验
取同一份供试品溶液.按样品测定法操作,重复测定6次,结果RSD=O.16%,表明该法重复性好。结果见表3。
表3总黄酮含量测定重复性试验结果
(n=6)
3.2.2重现性实验
取同一供试品5份.各约o.79,精密称定,分别按样品测定法操作,计算每份的含量.结果见表4。
裘4总黄酮含■测定重现性试验结果
(n=5)
3.3准确度试验
取已知总黄酮含量的蜜炙桑白皮饮片粗粉o.3595份,精密称定.分别精密加入一定量的芦丁对照品.按“2.2.2”项下方法制备,按设定条件进行测定,计算回收率,结果平均加样回收率为99.2%.RSD=1.86%.表明加样回收率符合要求。结果见表5。
表5
总黄酮含量测定加样回收率试验结果(n=5)
3.4样品测定
精密称取样品粗粉o.79,精密称定,置具塞锥形瓶中。精密加入50%乙醇50mL.称定重量.超声处理90min,放至室温后.加50%乙醇补重,滤过.精密量取续滤液2.4mL.置10mL量瓶中.按“2.3”项下显色操作.以相应试剂为空白,在500nm波长处测定吸光度.并按回归方程计算总黄酮含量。结果平均总黄酮含量为1.26%。
一23—
木糖醇抑菌作用研究
张桃苹
(武汉人福药业有限责任公司,湖北武汉430071)
摘
要:目的:测定木糖醇的抑茵效力。方法:把木糖醇配成20%和35%的水溶液,按照2010年版《中
国药典》二部附录XIXN《抑茵剂效力检查法指导原则》L23用大肠埃希菌、金黄色葡萄球茵、铜绿假单胞茵、白色念珠茵、黑曲霉采进行实验。结果:20%的木糖醇溶液没有抑菌作用,35%的木糖醇溶液具有抑
茵作用。结论:木糖醇可作矫味剂的同时也具有一定抑茵作用。
关键词:木糖醇;抑茵效力;培养基;茵种中图分类号:R96
文献标识码:A文章编号:1673—2197(2011)06—0024一02
木糖醇通常被用作甜味剂和无糖制剂中的辅料,而并不被认为具有防腐效果。木糖醇用在口服液体制剂当中通常是无毒,无致敏,无刺激的,木糖醇的血糖指数也很低,而且其代谢不依赖胰岛素。木糖醇在口服液体制剂中可以在作为矫味剂的同时达到抑制微生物生长的效果,从而避免了防腐剂的使用[1]。把木糖醇配成20%和35%的水溶液,按照2010年版《中国药典》二部附录xIXN《抑菌剂效力检查法指导原则》心1用大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉来进行实验。报道如下。
l
1.1.2
茵液制备
接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至胰酪胨大豆肉汤培养基中,30℃~35℃培养18~24h;接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖肉汤培养基中,20℃~25℃培养24~48h。上述培养物用o.9%无菌氯化钠溶液(取供试液1mL,接种到9mI,灭菌生理盐水中)制成每1mI,含菌数为50~100cfu的菌悬液。接种黑曲
霉的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基中,20℃~
25℃培养5~7d,加入3~5mL含O.05%(mL/mL)聚山梨
实验方法
菌种
酯80的o.9%无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱,用含o.05%
(mL/mL)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液稀释制成
1.1培养基的适用性检查
1.1.1
孢子数50~100cfu的菌悬液。
1.2适用性检查方法
取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌各50~100cfu,分别注人无菌平皿中.再分别立即倾注胰酪胨大豆琼脂培养基,每株试验菌平行制备2个平皿,混匀,凝固,置30℃~35℃培养48h.计数;取白色念珠菌、黑曲霉各50~
研究。参考文献:
[1]
国家药典委员会.中华人民共和国药典[s].一部.北京:化学工业出版社,2005.209.
[2]傅立国.陈潭清,郎楷永,等.中国高等植物(第四卷)[M].青
岛:青岛出版社.2000.29.
[3]张国刚.黎琼红。李乐道.等.桑自皮中总黄酮提取工艺研究
[J].中草药.2005・36(1
1);1662.
铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)[CMCC(B)10104];大肠埃希菌(Escherichiacoli)[cMCc(B)44102];金黄色葡萄球菌(staphylococcus
2698
aureus)[CMcC(B)albicans)[CMCC(F)
003];白色念珠菌(candida
001];黑曲霉(Aspergillusniger)[CMCc(F)98003]。
4讨论
紫外分光光度法测定总黄酮含量的方法简便、准确、可靠.有报道用此法测定桑白皮中总黄酮含量,因此选用紫外分光光度法测定蜜炙桑白皮中总黄酮的含量。选用50%乙醇为提取溶剂.是为了尽量将总黄酮提取完全。但又可以减少提取液中脂溶性成分,避免了脂溶性成分的干扰。
按此方法分别测定桑向皮饮片和经过蜜炙后的炮制品总黄酮含量.桑自皮中总黄酮平均含量为1.25%,而蜜炙桑白皮饮片中总黄酮含量却为1.26%.经过蜜炙后,总黄酮含量基本无变化.虽然峰蜜中含有总黄酮或者其他干扰成分,但其含量较低。因此虽然有干扰,但是不明显,可作进一步收稿日期:2011-04一02
[4]李洪娟.孙居锋.代现平.等.桑白皮总黄酮超声波提取法研
究[J].安徽农业科学.2009-37(3):1188.
(责任编辑:宋勇刚)
作者简介:张桃苹.女,武汉人福药业有限责任公司助理工程师.研究方向为新药研发。
一24—万方数据
蜜炙桑白皮总黄酮的含量测定方法
作者:作者单位:刊名:英文刊名:年,卷(期):
杨方明, 韦史利, 邬文力
杨方明,邬文力(广州中一药业有限公司,广东广州,510530), 韦史利(广州中医药大学新药中心,广东广州,510405)
亚太传统医药
Asia-Pacific Traditional Medicine2011,07(6)
参考文献(4条)
1.李洪娟;孙居锋;代现平 桑白皮总黄酮超声波提取法研究[期刊论文]-安徽农业科学 2009(03)2.张国刚;黎琼红;李乐道 桑白皮中总黄酮提取工艺研究[期刊论文]-中草药 2005(11)3.傅立国;陈潭清;郎楷永 中国高等植物(第四卷) 20004.国家药典委员会 中华人民共和国药典,一部 2005
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1. 赵丽.谢丽.李静.胡本祥 太白米总黄酮含量测定方法研究[期刊论文]-现代中医药2012,32(2)2. 杨卓.杨爱淑 参茸固本片中阿魏酸含量测定[期刊论文]-科技创业家2012(2)
3. 王琦.马柏林.陆勇芹.WANG Qi.MA Bai-lin.LU Yong-qin 正交试验法优选兰州百合总皂甙的超声提取工艺[期刊论文]-西安文理学院学报(自然科学版)2007,10(1)
4. 张周菊.李森.何再安.陈树和.刘焱文.ZHANG ZhouJu.LI Sen.HE Zaian.CHEN Shuhe.LIU Yanwen 空心莲子草总黄酮的含量测定[期刊论文]-湖北中医药大学学报2012,14(1)
5. 张倩茹.南莹.娄方明.黄燮南.ZHANG Qianru.NAN Ying.LOU Fang-ming.HUANG Xie-nan 女贞属苦丁茶中总黄酮的含量测定[期刊论文]-遵义医学院学报2011,34(1)
6. 杨正宇.谭玉武 百合栽培及加工技术[期刊论文]-北京农业2003(8)
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炙桑皮与蜜桑皮篇二
《炮制对桑白皮止咳平喘_利尿作用的影响》
2004年6月第26卷 第6期中成药
ChineseTraditionalPatentMedicineJune2004Vol.26 No.6
表7 黄芩供试饮片黄芩苷含量
加工方法含量(%)
市售饮片20.59产地蒸切22.75药典煮切22.82药典蒸切23.11产地蒸切21.16药典煮制19.36药典蒸制20.05
RSD/%
与煮制软化两种方法,试验与实际操作证明,煮制软化后需很长时间润制后方可切制,费工费时,而且煮制中成分流失高于蒸制,因此,建议《中国药典》统一为蒸制软化为宜。
3.3 《中国药典》2000年版黄芩项下,检查中无饮片的浸出
1.090.890.871.301.781.100.90
样品来源
2001年7月购于蒙阴市场2001年11月采于蒙阴坦埠
物、总灰分、酸不溶性灰分、水分检查,不利于全面控制饮片质量,本实验对此进行了初步探讨,为有效控制黄芩饮片质量,积累了资料,提供了依据。
3.4 将紫外谱线组法引入黄芩饮片鉴别中,并借用超声提
2002年11月采于蒙阴坦埠
3 总结与讨论
3.1 实验结果表明,山东黄芩实施加工炮制一体化,采收后
取技术,将浸提时间由1~6h缩短为5min,有利于从多组分指纹特征上补充黄芩饮片的鉴别手段,并为山东黄芩的地产特征提供了一定的依据。:
[].[M].北京:人民卫生
经7~10d,失水15%~30%时,硬度适宜,便于净制,蒸
15min后,切制成饮片,不仅可大大节省能源,加快饮片上
市,而且可减少二次加工中造成的药效成分损失,其成品与药典法制成的饮片内在质量一致。同时证明,效成分黄芩苷方面具有明显的道地优势,、化的良好前景。
3.2 《中国药典2000,收有蒸制软化
,1999.83.
[2] 中华人民共和国药典[S].北京:化学工业出版社,2000年版.
一部248.
炮制对桑白皮止咳平喘、利尿作用的影响
李 崧1, 王 澈1, 贾天柱2, 王敏伟1
(1.沈阳药科大学药学院药理系,辽宁沈阳110016;2.辽宁中医学院中药系炮制教研室,辽宁沈阳110032)
关键词:桑白皮;炮制;止咳平喘;利尿;豚鼠;家兔;小鼠
摘要:目的:对炮制前后桑白皮止咳平喘及利尿作用进行对比。方法:利用豚鼠离体气管条实验、豚鼠引喘实验,家兔及大鼠利尿实验,小鼠二氧化硫引咳实验考察炮制前后桑白皮的平喘、利尿及镇咳作用。结果:实验结果表明,蜜炙桑白皮对组胺所引起的豚鼠离体气管条收缩有明显的解痉作用,对组胺所引起的气道痉挛也有明显保护作用,作用强度与炮制前相当;在镇咳、利尿实验中,蜜灸后的桑白皮利尿作用减弱,而镇咳作用增强。结论:蜜炙桑白皮与生桑白皮相比,作用有一定差异。生桑白皮长于利尿,而炮制后止咳平喘作用加强。
中图分类号:R283.1 文献标识码:A 文章编号:100121528(2004)0620471203
Effectofprocessingonantitussive,antiasthmaticanddiureticactivitiesofMor2rusalbaL.
LISong1, WANGChe1, JIATian2zhu2, WANGMin2wei1
(1.CollegeofPharmacy,ShenyangPharmaceuticalUniversity,Shangang110016,China;2.LiaoningTraditionalMedicineCollege,Liaon2ing110032,China)
KEYWORDS:MorrusalbaL.;process;antitussiveandantiasthmaticactivities;diureticeffect;guineapig;rabbit;mouse
ABSTRACT:AIM:ToinvestigatetheantitussiveandantiasthmaticactivitiesanddiureticactivityofMorrusal2baL.beforeandafterbeingprocessed.METHODS:Theantitussiveandantiasthmaticactivitiesinvivo(hyper2
收稿日期:2003207221
作者简介:李崧(1975~),男,辽宁省沈阳市人,助教,理学硕士,主要研究方向:呼吸系统药理,电话:02422384371123317。
471
2004年6月第26卷 第6期中成药
ChineseTraditionalPatentMedicineJune2004Vol.26 No.6
sensitivity)andinvitro(functionalexperiments)ofMorrusalbaL.beforeandafterbeingprocessedwerein2vestigated.ThediureticactivityofMorrusalbaL.beforeandafterbeingprocessedalsowerestudiedonratandrabbitmodels.RESULTS:TheprocessedMorrusalbaL.couldinhibitehistamine2inducedairwayhypersensi2tivity.It’sdiureticactivitywaslowerbutitsantitussiveactivitywasbetter.CONCLUSION:Theseresultsindi2catethattherearesomedifferentesbetweenMorrusalbaL.beforeandafterbeingprocessedinantitussive,an2tiasthmaticanddiureticactivities.ThediureticactivityofcrudeMorrusalbaL.issuperiortotheprocessed
MorrusalbaL.ButitsantitussiveandantiasthmaticactivitiesareinferiortotheprocessedMorrusalbaL.
桑白皮(MorrusalbaL.rootbark)是临床上常用的止咳平喘中药,味甘寒,性降,主入肺经,以泻肺热、平喘为专长,能利尿消肿,通调水道,并能肃降肺气,宜用于水肿实证,小便不利,面目浮肿,或水饮停肺,胀满喘急等症。桑白皮水提取物大鼠灌胃有利尿作用,尿量及尿中钠、加[1]。已有研究认为其平喘、物
[2]
1.3 药品试剂:磷酸组胺为上海东风试剂公司产品。其余
试剂均为市售化学纯。SO2:取250mL蒸馏瓶,,,蒸馏瓶侧管用橡,蒸馏瓶内产生SO2,收集于球胆中,,用时以注射器吸取8~10mL。
1.4 实验仪器:小动物代谢笼,JSC2A型多功能超声波雾化
。蜜炙桑白皮的平喘、,进行对比分析,。
1 实验材料
1.1 实验样品:生桑白皮和蜜炙桑白皮提取物,由本实验室
器(鞍山市电子医疗仪器厂),台式自动平衡记录仪(中国上海大华仪表厂),离体麦氏浴槽,张力换能器等。
2 实验方法与结果
2.1 炮制对桑白皮利尿作用的影响(大鼠利尿实验[3])
自行提取制备。桑白皮粉碎后,分别以10倍量、8倍量水提取2次,合并提取液浓缩至3g生药・mL
-1
动物实验前24h禁食但不禁水。各组实验动物按2mL/
100g体重i.g生理盐水,轻压下腹部排空膀胱。然后i.g给
,生理盐水稀释至
所需浓度。桑白皮购自沈阳市东北大药房,经鉴定为桑科植物桑MorrusalbaL.的干燥根皮。蜜炙桑白皮由辽宁中医学院炮制教研室加工,生药与蜜量之比为1∶4,炮制前需浸润12h。
1.2 实验动物:雄性昆明种小白鼠,体重18~22g;雄性豚
予受试样品,剂量按生药计0.3~3g生药・kg-1,给药体积为
5mL・kg-1,空白对照组口服同体积生理盐水。实验动物给
药完毕后迅速放入代谢笼中,收集每6min尿量,共4次。
实验样品对大鼠尿量的影响结果见表1。由实验结果可以看出,生桑白皮显示出较好的利尿作用,实验动物在给药后尿量逐渐增加,并呈现良好的剂量效应关系,与文献报道一致。而蜜炙后桑白皮的利尿作用与炮制前相比,作用弱,维持时间短,显示出与炮制前不同的作用特点。
鼠,体重200~350g(引喘实验用幼年豚鼠体重120~150g);雄性Wistar大鼠,体重100~150g;健康雄性家兔,体重1.5~2kg。以上实验动物由沈阳药科大学实验动物中心提供。合格证号:辽实合字第033号。
Tab1
DrugsControltheprocessed
MorrusalbaL.MorrusalbaL.
n
TheDiureticactivityinrats.(
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